公开(公告)号：CN119876489A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202510212347.0

申请日：2025-02-25

Applicant: 上海市疾病预防控制中心 ,  复旦大学 ,  上海速创诊断产品有限公司

Inventor： 陈敏 ,  孔继烈 ,  赵雪 ,  滕峥 ,  张曦 ,  吴寰宇 ,  陈昕 ,  方雪恩 ,  李杨 ,  顾宜静

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  B01L3/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种用于检测季节性流感病毒的等温扩增检测引物组合和微流控芯片及其应用。该引物组合基于环介导等温扩增技术设计，针对季节性流感病毒(H1N1、H3N2及Victoria)的保守基因序列，包括5条特异性引物，能够在等温条件下快速、高效地扩增目标病毒核酸。本发明还提供了一种集成该引物组合的微流控芯片，芯片采用多层结构设计，集成多个独立反应单元，每个单元预载LAMP引物组，支持多重检测，该微流控芯片具有高通量、低试剂消耗和快速检测的特点，可在30分钟内完成从核酸输入到结果输出的过程；对季节性流感病毒的检测灵敏度达到102copies/uL，特异性高，无交叉反应，批间变异系数小。

公开(公告)号：CN119736379A

公开(公告)日：2025-04-01

申请号：CN202411947979.3

申请日：2024-12-27

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈惠 ,  李寒雪 ,  张云培 ,  孔继烈

IPC: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/682 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于miRNA检测的技术领域，具体为一种基于CpAgo蛋白介导RCA反应的多重miRNA检测体系和方法。本发明利用RCA恒温下的高效扩增能力与CpAgo恒温下的精准切割、多周转酶特性，设计一锅法检测多重miRNA体系；将两者整合于单一封闭反应管内完成反应，减少两步法带来的多次开盖操作，从而有效降低气溶胶污染的风险；该体系充分发挥CpAgo与RCA的协同效应，具备良好的多重检测能力，为miRNA的高检测提供了全新的解决方案。

公开(公告)号：CN116794299A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310297040.6

申请日：2023-03-24

Applicant: 复旦大学

Inventor： 方雪恩 ,  熊桧文 ,  朱晨鑫 ,  李品涛 ,  孔继烈

IPC: G01N33/561 ,  G01N33/68 ,  G01N1/40 ,  G01N27/30 ,  G01N27/327 ,  G01N27/48 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，具体为一种基于微流控芯片的重大疾病标志物电化学发光检测方法。本发明采用微流控芯片作为检测平台，其中有两个驱动电极用于提供交变电场；本发明利用抗原抗体间特异性识别特性以及核酸等离子体共振免扩增原理进行检测；在检测样本和电化学发光反应液间注入隔离液，去除芯片洗脱操作；在芯片流道检测区域施加电驱动信号来提高对样本中重大疾病标志物的捕获效率，进而实现对重大疾病蛋白和核酸标志物的快速且高灵敏的检测。本发明方法针对重大疾病各种标志物的检测准确且灵敏，能够用于血清、唾液、尿液、组织液等样本的检测，具有潜在的社会经济价值。

公开(公告)号：CN116297762A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310212594.1

申请日：2023-03-07

Applicant: 复旦大学

Inventor： 方雪恩 ,  熊桧文 ,  戴长昊 ,  李品涛 ,  孔继烈

IPC: G01N27/327 ,  G01N27/414 ,  G01N21/76 ,  G01N33/569 ,  B01L3/00

Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，具体为一种基于微流控平台的光电联合病原体检测装置及方法。本发明检测装置包括点样区微通道、光电联合检测模块、废液池，点样区微通道为S形；光电联合检测模块是由检测单元组成的阵列，每个检测单元包括电化学发光单元和晶体管传感单元；电化学发光测量单元和晶体管测量单元分别修饰有敏感材料和生物识别分子，用于特异性识别；本发明分析速度快、检测精度高，在15分钟内实现病原体样本中蛋白和核酸的高灵敏性联合检测，解决了检测灵敏度低、多次测试操作繁琐、检测时间长、准确性差等问题。

公开(公告)号：CN115992206A

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202210917595.1

申请日：2022-08-01

Applicant: 复旦大学

Inventor： 林秋媛 ,  陈惠 ,  孔继烈

IPC: C12Q1/6848

Abstract: 本发明公开了一种Argonaute介导的一锅法microRNA检测体系及检测方法。本发明提供了一种microRNA检测方法，其包括将待测核酸样本、指数扩增反应体系和microRNA检测体系混合，形成混合反应体系，进行反应，获得反应物中的荧光信号，实现microRNA的检测；microRNA检测体系包括向导DNA、Argonaute核酸酶和检测探针，且指数扩增反应体系扩增目标物microRNA所获得的扩增产物作为向导DNA。本发明的体系及方法首次建立了EXPAR扩增与Ago特异性剪切一体化的一锅法检测，实现在单个反应体系中同时扩增、剪切和单个或多个目标物检测，避免气溶胶污染，操作便捷、方法高效。

公开(公告)号：CN114107019A

公开(公告)日：2022-03-01

申请号：CN202111412079.5

申请日：2021-11-25

Applicant: 复旦大学 ,  上海速创诊断产品有限公司 ,  上海速芯生物科技有限公司

Inventor： 方雪恩 ,  林秋媛 ,  刘丽玲 ,  孔继烈

IPC: C12M1/34 ,  C12M1/40 ,  C12M1/00 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  G01N33/543 ,  G01N33/558 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种同时检测核酸和蛋白质的微流控芯片、检测方法及用途。本发明提供了一种同时检测核酸和蛋白质的微流控芯片，其包括：样品加载腔室；以及样本流动通道，其包括流道检测区，流道检测区用于侧向免疫层析反应；在流道检测区中，沿流体在微流控芯片中的流动方向，依次设置有捕获区、第一检测区和第二检测区；捕获区包括包被有捕获抗体的荧光微粒和包被有与第一修饰物特异性结合的分子的荧光微粒；第一检测区和第二检测区分别包括与第二生物样品中待测蛋白质特异性结合的分子和/或与第二修饰物特异性结合的分子。本发明提供了用于核酸和蛋白质的同时检测的快速、便携和经济的微流控芯片平台。

公开(公告)号：CN106442516B

公开(公告)日：2019-06-18

申请号：CN201611054753.6

申请日：2016-11-25

Applicant: 复旦大学 ,  上海速创诊断产品有限公司

Inventor： 陈伟伟 ,  方雪恩 ,  李花 ,  曹宏梅 ,  王欣珍 ,  杨茜 ,  王丽娟 ,  孔继烈

IPC: G01N21/78 ,  G01N21/82

Abstract: 本发明涉及一种利用纸芯片比色分析装置检测核酸浓度的方法，所述纸芯片比色分析装置包括纸芯片、模具基底以及光纤分析设备，所述检测核酸浓度的方法包括以下步骤：将纸芯片放置在模具基底上，在纸芯片上预先滴加TMB/H2O2显色底物溶液；滴加核酸铂纳米复合材料至纸芯片上，与显色底物溶液混合后反应3‑4分钟；观测并记录纸芯片的比色结果，显色颜色从无色变化至蓝色，颜色深度与核酸浓度成反比；将纸芯片放置于光纤分析设备中，进一步数值化精确读取纸芯片的颜色强度。与现有技术相比，本发明所述的核酸浓度定量检测方法具有很大的优势，其操作简单，便携性强，能够实现对0.0075uM目标核酸浓度的检测，且成本较低，具有十分优异的经济效益，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN104611457B

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201510095338.4

申请日：2015-03-04

Applicant: 上海速芯生物科技有限公司 ,  复旦大学

Inventor： 方雪恩 ,  王丽娟 ,  陈旭 ,  徐凌佳 ,  孔继烈

IPC: C12Q1/686 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种用于多靶点基因扩增的Arm‑PCR引物设计方法，其是通过以下步骤实现的：a、用LAMP软件代替icubate2.0在线软件设计小片段靶基因的引物；b、将LAMP软件设计出的内引物前面的成环引物序列换成Arm‑PCR引物的通用接头序列；c、Arm‑PCR反应体系的配制；d、Arm‑PCR反应条件的设定与运行；e、Arm‑PCR产物的毛细管电泳检测。本发明采用LAMP软件设计出的引物组较多，有利于多重引物组的筛选，本发明用于多靶点基因扩增的Arm‑PCR引物设计方法，可以使小片段靶基因的Arm‑PCR引物得以成功设计，进而使Arm‑PCR多重反应变得简单可行。

公开(公告)号：CN104513861B

公开(公告)日：2019-03-12

申请号：CN201510018179.8

申请日：2015-01-14

Applicant: 上海速芯生物科技有限公司 ,  复旦大学

Inventor： 李海鹏 ,  方雪恩 ,  王丽娟 ,  曹宏梅 ,  陈旭 ,  徐凌佳 ,  孔继烈

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种转基因大豆MON89788及其衍生品种的LAMP检测引物组、检测试剂盒和检测方法。检测引物组包括四条特异性引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、DNA聚合酶和对照；试剂盒还可以有显色剂或荧光指示剂；其检测方法是通过提取待检大豆品种的DNA、采用四条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在60～65℃对样品DNA模板进行扩增，短时间扩增效率可达到109～1010个拷贝，其鉴定采用反应管内沉淀的浊度变化、加入显色剂观察反应管内颜色变化、利用实时荧光检测仪观察确定待检大豆品种是否含有或为转基因大豆MON89788及其衍生品种。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。

公开(公告)号：CN109030456A

公开(公告)日：2018-12-18

申请号：CN201810976484.1

申请日：2018-08-25

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈惠 ,  邓地 ,  孔继烈

IPC: G01N21/65

CPC classification number: G01N21/658

Abstract: 本发明属于纳米材料技术领域，具体为表面增强拉曼光谱检测基底及其制备方法与应用。本发明的表面增强拉曼光谱检测基底为由银纳米颗粒修饰的玻璃纤维纸；其制备方法包括，利用抗坏血酸和硼氢化钠对硝酸银在纸基底上进行原位“二次还原法”还原。将该增强拉曼光谱检测基底置于含有被检测物的溶液中，通过检测纸基底，可以检测到被测物的拉曼信号，并得到浓度信息。使用本发明的增强拉曼光谱检测纸基底对鱼肉样品中的孔雀石绿进行检测，具有快速、高效、灵敏度高、成本低、操作简单等优点。