公开(公告)号：CN101928774B

公开(公告)日：2012-03-14

申请号：CN201010199157.3

申请日：2010-06-12

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 曹斌云 ,  安小鹏 ,  侯金星 ,  王利心 ,  王建刚 ,  宋宇轩

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种检测山羊生长激素（GH）基因编码区5个碱基突变多态性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、Buffer（缓冲环境）、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用两对反应（PCR）引物P1和P2，在PCR条件下进行扩增，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行扩增目的片段大小判定；采用DNA测序技术筛查到山羊GH基因编码区5个碱基的突变，然后对GH基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析，以及与布尔山羊、布尔山羊和关中奶山羊的杂交后代（F1和F2代）3月龄的生长性状之间进行了关联分析；结果表明：GH基因P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊生长性状早期选择（3月龄）的分子标记。

公开(公告)号：CN101865798B

公开(公告)日：2011-11-09

申请号：CN201010199444.4

申请日：2010-06-12

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 曹斌云 ,  姬云涛 ,  安小鹏 ,  侯金星 ,  王建刚 ,  宋宇轩

IPC: G01N1/30

Abstract: 本发明公开了一种聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）电泳中的DNA银染方法，先用0.1% AgNO3浸泡聚丙烯酰胺凝胶10–15min，用蒸馏水清洗2次，其次用0.04%的Na2CO3、2mL的37% HCOH/L、2%的NaOH混合溶液显色5–6 min，蒸馏水冲洗2次即可完成全部染色过程。传统的DNA银染方法需要5-6种化学试剂，配制4中溶液，花费40-60min才能完成染色步骤，而本方法只需要4种化学试剂，配制2种溶液，花费20min就可以达到与传统染色方法相同的结果，而且在变性聚丙烯酰胺电泳（PAGE）中，本染色方法可以将DNA的量降低到0.44ng；在非变性聚丙烯酰胺电泳（PAGE）中可以将DNA的量降低到3.5ng。本方法与传统染色方法相比，不仅节约了时间，降低额成本，而且提高了检测的灵敏度。

公开(公告)号：CN101967484A

公开(公告)日：2011-02-09

申请号：CN201010199264.6

申请日：2010-06-12

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 曹斌云 ,  安小鹏 ,  侯金星 ,  王建刚 ,  宋宇轩 ,  杨明明

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种奶山羊多胎和单胎卵巢差异表达新基因及其筛选、鉴定和功能分析方法，以西农萨能奶山羊为试验材料，采用抑制性消减杂交技术构建奶山羊多胎（3羔）和单胎乏情期卵巢组织正反向消减cDNA文库，筛选差异表达基因片断，利用实时定量PCR验证差异表达基因，并利用生物信息学分析基因结构和潜在的功能。