一种热稳定的基因VIII型新城疫弱毒株外源基因表达载体

    公开(公告)号:CN109295095A

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201811244137.6

    申请日:2018-10-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及兽医病毒分子生物学领域,公开了一种热稳定的基因Ⅷ型新城疫弱毒株外源基因表达载体,所述表达载体是新城疫病毒NDV-rAHR09-GFP-1,它的保藏号为CCTCC NO:V201844。研究表明,NDV-rAHR09-GFP-1在自然条件下具有良好的热稳定性,56℃、90min仍保持血凝活性和感染能力,能稳定表达GFP基因。

    用于鉴别不同血清型传染性支气管炎病毒活疫苗的半套式RT-PCR分型引物及试剂盒

    公开(公告)号:CN108866242A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201810972679.9

    申请日:2018-08-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体涉及鸡传染性支气管炎病毒活疫苗的RT‑PCR分型检测引物及试剂盒。本发明所述的分型检测引物由序列如SEQ ID NO.1-2所示的通用引物和序列如SEQ ID NO.3-6所示的血清型特异性引物组成。本发明还公开了包含上述分型检测引物的试剂盒。利用本发明的引物和试剂盒,采用半套式RT‑PCR方法鉴别M型、4/91型、LDT3‑A型和QX型血清型传染性支气管炎病毒活疫苗,与常规PCR方法相比,具有更强的特异性和敏感性;还具有快速、高效、低成本的特点,可在5~6h内完成样品的检测,克服了传统血清中和试验的方法耗时较长的缺点,且该方法适合大批量样品的检测与分析。

    禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV-HA病毒株及构建方法

    公开(公告)号:CN101575616B

    公开(公告)日:2011-08-31

    申请号:CN200710133953.5

    申请日:2007-10-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及家禽用禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV-HA病毒株及构建方法。本发明采用反转录-聚合酶链反应或聚合酶链反应扩增H5亚型禽流感病毒SY株血凝素基因、网状内皮增生症病毒LTR、筛选标志基因lac/smGFP和马立克氏病毒Rispens CVI 988疫苗株基因组外源基因并将其克隆到质粒载体中,得到重组质粒pHA、pLTR、ploxP-lac/smGFP-loxP、pUP和pDOWN,将转移载体pMHA质粒DNA与从马立克氏病毒Rispens CVI 988疫苗株感染细胞提取的DNA共转染鸡胚成纤维细胞,同源重组将外源基因插入到马立克氏病毒RispensCVI 988疫苗株基因组,得到带筛选标志基因的重组病毒rMDV-HA/GFP;由cre酶介导的loxP位点间序列重组去除rMDV-HA/GFP的筛选标志基因lac/smGFP,纯化后得到rMDV-HA病毒株。成本低、无污染、免疫期长,可作为禽流感和马立克氏病二联活疫苗病毒株。

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