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公开(公告)号:CN102433269B
公开(公告)日:2012-10-17
申请号:CN201110321155.1
申请日:2011-10-21
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N1/20 , C12N15/56 , C12N9/42 , C05F3/00 , C05F11/02 , C05F11/08 , A61K35/74 , A61P1/00 , C12R1/07
CPC classification number: Y02A40/205
Abstract: 本发明涉及一种新的芽孢杆菌,分类命名是短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1。该短小芽孢杆菌从藏猪新鲜粪便中分离,能产生纤维素酶,具有降解羧甲基纤维素钠的能力,在37℃,220rpm培养96h后羧甲基纤维素酶活性为0.92μmol/ml·min。以Bacillus pumilusSAFR-032内切酶基因bglC基因序列为参考,设计引物成功扩增出了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1的内切-β-1,4-葡聚糖酶基因,命名为bglC-BY。经NCBI blast该基因与bglC相似度为88%,而与Bacillus pumilus endoglucanase A precursor(EglA)基因相似性较高为96%,实现了pET表达系统表达并在培养温度为30℃,220rpm情况下,在菌液吸光值A595为0.7534时开始诱导,诱导后42h小时活性最高,胞外酶活测定最高为0.5434μmol/ml·min。
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公开(公告)号:CN101928774B
公开(公告)日:2012-03-14
申请号:CN201010199157.3
申请日:2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测山羊生长激素(GH)基因编码区5个碱基突变多态性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,以山羊基因组DNA序列为模板,在TaqDNA聚合酶、Buffer(缓冲环境)、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用两对反应(PCR)引物P1和P2,在PCR条件下进行扩增,根据琼脂糖凝胶电泳对其进行扩增目的片段大小判定;采用DNA测序技术筛查到山羊GH基因编码区5个碱基的突变,然后对GH基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析,以及与布尔山羊、布尔山羊和关中奶山羊的杂交后代(F1和F2代)3月龄的生长性状之间进行了关联分析;结果表明:GH基因P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊生长性状早期选择(3月龄)的分子标记。
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公开(公告)号:CN101865798B
公开(公告)日:2011-11-09
申请号:CN201010199444.4
申请日:2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明公开了一种聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳中的DNA银染方法,先用0.1% AgNO3浸泡聚丙烯酰胺凝胶10–15min,用蒸馏水清洗2次,其次用0.04%的Na2CO3、2mL的37% HCOH/L、2%的NaOH混合溶液显色5–6 min,蒸馏水冲洗2次即可完成全部染色过程。传统的DNA银染方法需要5-6种化学试剂,配制4中溶液,花费40-60min才能完成染色步骤,而本方法只需要4种化学试剂,配制2种溶液,花费20min就可以达到与传统染色方法相同的结果,而且在变性聚丙烯酰胺电泳(PAGE)中,本染色方法可以将DNA的量降低到0.44ng;在非变性聚丙烯酰胺电泳(PAGE)中可以将DNA的量降低到3.5ng。本方法与传统染色方法相比,不仅节约了时间,降低额成本,而且提高了检测的灵敏度。
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公开(公告)号:CN101967484A
公开(公告)日:2011-02-09
申请号:CN201010199264.6
申请日:2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种奶山羊多胎和单胎卵巢差异表达新基因及其筛选、鉴定和功能分析方法,以西农萨能奶山羊为试验材料,采用抑制性消减杂交技术构建奶山羊多胎(3羔)和单胎乏情期卵巢组织正反向消减cDNA文库,筛选差异表达基因片断,利用实时定量PCR验证差异表达基因,并利用生物信息学分析基因结构和潜在的功能。
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公开(公告)号:CN104327139B
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201410507918.5
申请日:2014-09-28
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: Y02P20/582
Abstract: 本发明公开了一种虫草素晶体的制备方法,包括下述步骤:1)以培养蛹虫草子座剩余的基质为原料,将基质粉碎后以有机溶剂进行浸提,离心收集上清液;2)利用大孔树脂吸附色谱柱对离心后的粗液进行纯化;3)步骤2)所得虫草素采用乙醇、硫酸铵组成的双水相体系进行富集并收集样品;4)装层析柱,甲醇溶液洗脱,洗脱液减压蒸馏浓缩,浓缩的洗脱液甲醇洗脱,洗脱液结晶得到虫草素晶体。本发明公开的虫草素晶体的制备方法降低了生产成本,并且提高了虫草素纯度,避免了有机溶剂残留。
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公开(公告)号:CN103421707B
公开(公告)日:2015-02-25
申请号:CN201310306437.3
申请日:2013-07-19
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种藏猪源芽孢杆菌及其应用。所公开的藏猪源芽孢杆菌经细菌形态学鉴定、生化鉴定和分子学鉴定,按照分类将其命名为枯草芽孢杆菌BY-2(Bacillus subtilis BY-2),保藏编号为:CCTCC NO:M2012535。该枯草芽孢杆菌BY-2从藏猪盲肠内容物中分离,能产生较高的纤维素分解酶,具有降解羧甲基纤维素钠的能力。
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公开(公告)号:CN102631521A
公开(公告)日:2012-08-15
申请号:CN201210129469.6
申请日:2012-04-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K36/8945 , C07J71/00 , A61P35/00 , A61P31/10 , A61P9/00 , A61P3/10 , A61P37/02 , A61K125/00
Abstract: 本发明公开了一种双水相萃取薯蓣皂苷的方法。本方法以乙醇/硫酸铵双水相体系作为提取剂,采用超声波/SDS协同辅助双水相体系萃取薯蓣皂苷,然后通过酸水解生产薯蓣皂苷元。采用本方法,每克薯蓣干粉可得到27.5mg以上薯蓣皂苷元,纯度达到85%以上,单次萃取回收率超过60%。本方法与传统的酸水解方法比较,具有提取快速,酸用量少,污染小等优点;与一般的盐/聚合物双水相比较具有成本低、操作容易、上下相溶剂易回收等优点。
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公开(公告)号:CN102433269A
公开(公告)日:2012-05-02
申请号:CN201110321155.1
申请日:2011-10-21
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N1/20 , C12N15/56 , C12N9/42 , C05F3/00 , C05F11/02 , C05F11/08 , A61K35/74 , A61P1/00 , C12R1/07
CPC classification number: Y02A40/205
Abstract: 本发明涉及一种新的芽孢杆菌,分类命名是短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1。该短小芽孢杆菌从藏猪新鲜粪便中分离,能产生纤维素酶,具有降解羧甲基纤维素钠的能力,在37℃,220rpm培养96h后羧甲基纤维素酶活性为0.92μmol/ml·min。以Bacillus pumilusSAFR-032内切酶基因bglC基因序列为参考,设计引物成功扩增出了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1的内切-β-1,4-葡聚糖酶基因,命名为bglC-BY。经NCBI blast该基因与bglC相似度为88%,而与Bacillus pumilus endoglucanase A precursor(EglA)基因相似性较高为96%,实现了pET表达系统表达并在培养温度为30℃,220rpm情况下,在菌液吸光值A595为0.7534时开始诱导,诱导后42h小时活性最高,胞外酶活测定最高为0.5434μmol/ml·min。
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