一种芽孢杆菌及其应用
    41.
    发明授权

    公开(公告)号:CN102433269B

    公开(公告)日:2012-10-17

    申请号:CN201110321155.1

    申请日:2011-10-21

    CPC classification number: Y02A40/205

    Abstract: 本发明涉及一种新的芽孢杆菌,分类命名是短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1。该短小芽孢杆菌从藏猪新鲜粪便中分离,能产生纤维素酶,具有降解羧甲基纤维素钠的能力,在37℃,220rpm培养96h后羧甲基纤维素酶活性为0.92μmol/ml·min。以Bacillus pumilusSAFR-032内切酶基因bglC基因序列为参考,设计引物成功扩增出了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1的内切-β-1,4-葡聚糖酶基因,命名为bglC-BY。经NCBI blast该基因与bglC相似度为88%,而与Bacillus pumilus endoglucanase A precursor(EglA)基因相似性较高为96%,实现了pET表达系统表达并在培养温度为30℃,220rpm情况下,在菌液吸光值A595为0.7534时开始诱导,诱导后42h小时活性最高,胞外酶活测定最高为0.5434μmol/ml·min。

    检测山羊生长激素基因编码区5个碱基突变多态性的方法

    公开(公告)号:CN101928774B

    公开(公告)日:2012-03-14

    申请号:CN201010199157.3

    申请日:2010-06-12

    Abstract: 本发明公开了一种检测山羊生长激素(GH)基因编码区5个碱基突变多态性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,以山羊基因组DNA序列为模板,在TaqDNA聚合酶、Buffer(缓冲环境)、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用两对反应(PCR)引物P1和P2,在PCR条件下进行扩增,根据琼脂糖凝胶电泳对其进行扩增目的片段大小判定;采用DNA测序技术筛查到山羊GH基因编码区5个碱基的突变,然后对GH基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析,以及与布尔山羊、布尔山羊和关中奶山羊的杂交后代(F1和F2代)3月龄的生长性状之间进行了关联分析;结果表明:GH基因P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊生长性状早期选择(3月龄)的分子标记。

    一种聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA银染方法

    公开(公告)号:CN101865798B

    公开(公告)日:2011-11-09

    申请号:CN201010199444.4

    申请日:2010-06-12

    Abstract: 本发明公开了一种聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳中的DNA银染方法,先用0.1% AgNO3浸泡聚丙烯酰胺凝胶10–15min,用蒸馏水清洗2次,其次用0.04%的Na2CO3、2mL的37% HCOH/L、2%的NaOH混合溶液显色5–6 min,蒸馏水冲洗2次即可完成全部染色过程。传统的DNA银染方法需要5-6种化学试剂,配制4中溶液,花费40-60min才能完成染色步骤,而本方法只需要4种化学试剂,配制2种溶液,花费20min就可以达到与传统染色方法相同的结果,而且在变性聚丙烯酰胺电泳(PAGE)中,本染色方法可以将DNA的量降低到0.44ng;在非变性聚丙烯酰胺电泳(PAGE)中可以将DNA的量降低到3.5ng。本方法与传统染色方法相比,不仅节约了时间,降低额成本,而且提高了检测的灵敏度。

    虫草素晶体的制备方法
    47.
    发明授权

    公开(公告)号:CN104327139B

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201410507918.5

    申请日:2014-09-28

    CPC classification number: Y02P20/582

    Abstract: 本发明公开了一种虫草素晶体的制备方法,包括下述步骤:1)以培养蛹虫草子座剩余的基质为原料,将基质粉碎后以有机溶剂进行浸提,离心收集上清液;2)利用大孔树脂吸附色谱柱对离心后的粗液进行纯化;3)步骤2)所得虫草素采用乙醇、硫酸铵组成的双水相体系进行富集并收集样品;4)装层析柱,甲醇溶液洗脱,洗脱液减压蒸馏浓缩,浓缩的洗脱液甲醇洗脱,洗脱液结晶得到虫草素晶体。本发明公开的虫草素晶体的制备方法降低了生产成本,并且提高了虫草素纯度,避免了有机溶剂残留。

    双水相萃取薯蓣皂苷的方法

    公开(公告)号:CN102631521A

    公开(公告)日:2012-08-15

    申请号:CN201210129469.6

    申请日:2012-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种双水相萃取薯蓣皂苷的方法。本方法以乙醇/硫酸铵双水相体系作为提取剂,采用超声波/SDS协同辅助双水相体系萃取薯蓣皂苷,然后通过酸水解生产薯蓣皂苷元。采用本方法,每克薯蓣干粉可得到27.5mg以上薯蓣皂苷元,纯度达到85%以上,单次萃取回收率超过60%。本方法与传统的酸水解方法比较,具有提取快速,酸用量少,污染小等优点;与一般的盐/聚合物双水相比较具有成本低、操作容易、上下相溶剂易回收等优点。

    一种芽孢杆菌及其应用
    50.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102433269A

    公开(公告)日:2012-05-02

    申请号:CN201110321155.1

    申请日:2011-10-21

    CPC classification number: Y02A40/205

    Abstract: 本发明涉及一种新的芽孢杆菌,分类命名是短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1。该短小芽孢杆菌从藏猪新鲜粪便中分离,能产生纤维素酶,具有降解羧甲基纤维素钠的能力,在37℃,220rpm培养96h后羧甲基纤维素酶活性为0.92μmol/ml·min。以Bacillus pumilusSAFR-032内切酶基因bglC基因序列为参考,设计引物成功扩增出了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1的内切-β-1,4-葡聚糖酶基因,命名为bglC-BY。经NCBI blast该基因与bglC相似度为88%,而与Bacillus pumilus endoglucanase A precursor(EglA)基因相似性较高为96%,实现了pET表达系统表达并在培养温度为30℃,220rpm情况下,在菌液吸光值A595为0.7534时开始诱导,诱导后42h小时活性最高,胞外酶活测定最高为0.5434μmol/ml·min。

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