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公开(公告)号:CN101718761A
公开(公告)日:2010-06-02
申请号:CN200910259888.X
申请日:2009-12-17
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种牛型结核菌素组分及活性的高效液相测定方法。本发明采用高效液相法测定牛型提纯结核菌素就能完全将核酸和结核蛋白分开,实现了核酸和蛋白的分离,完全消除核酸对蛋白的影响,准确地体现核酸和结核蛋白的相对含量。目前提纯牛型结核菌素的效价采用豚鼠标定法,该方法试验方法复杂,操作繁琐,影响因素较多,测定结果误差较大,而本发明提供的方法能很简单直接的测出效价结果,方法简单,数据准确可靠。
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公开(公告)号:CN110013547B
公开(公告)日:2023-02-03
申请号:CN201910284617.3
申请日:2019-04-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株重组小反刍兽疫病毒H基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株,以蔗糖自杀质粒为载体,将含有特定启动子序列的小反刍兽疫病毒H基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中,成功构建了能够高效表达型重组小反刍兽疫病毒H基因的重组布鲁氏菌RA343‑PPRV‑H株。该重组菌株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性,对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性,而且该重组菌免疫动物后,能产生针对小反刍兽疫的特异性中和抗体,从而实现对小反刍兽疫的免疫保护。用该重组苗株制备的疫苗,免疫动物后能同时实现对布病和小反刍兽疫的双重免疫保护。
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公开(公告)号:CN109999194B
公开(公告)日:2023-01-31
申请号:CN201910284347.6
申请日:2019-04-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: A61K39/10 , A61K39/135 , A61K39/295 , A61P31/04 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一株重组A型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗生产方法。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株,以蔗糖自杀质粒为载体,将含有特定启动子序列的A型口蹄疫病毒VP1基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中,成功构建了能够高效表达型FMDV VP1基因的重组布鲁氏菌RA343‑VP1‑FMDV‑A株。该重组疫苗株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性,对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性,而且该重组菌免疫动物后,能产生针对FMDV VP1抗体,从而实现对FMD的免疫保护。该重组疫苗株按特定工艺开发成具有耐热保护特点的新型疫苗,免疫动物后能同时实现对布病和口蹄疫的双重免疫保护。
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公开(公告)号:CN111733097B
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202010558550.0
申请日:2020-06-18
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C12N1/20 , C12N1/21 , C12N15/01 , C12N15/74 , C12N15/90 , C12N15/31 , A61K39/10 , A61K39/116 , A61P31/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开一种布鲁氏菌病保护菌株,所述菌株是由S型羊种布鲁氏菌Rev.1随机突变缺失基因获得的或缺失wadC基因获得的。本发明诱导S型羊种布鲁氏菌Rev.1随机突变缺失基因获得具有良好遗传稳定性的粗糙(R)型布鲁氏菌RM227;采用同源重组缺失技术从S型羊种布鲁氏菌Rev.1获得了缺少wadC基因、具有良好遗传稳定性的光滑(S)型布鲁氏菌Rev.1‑ΔwadC。本发明还提供一种布鲁氏菌病RS双价疫苗,包含一定浓度配比的粗糙(R)型布鲁氏菌RM227和光滑(S)型布鲁氏菌Rev.1‑ΔwadC,免疫小鼠实验证明,本发明RS双价疫苗既具有较好的免疫保护和安全性,又可以实现自然感染抗体与免疫所涉及的脂多糖(LPS)抗体的鉴别诊断。
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公开(公告)号:CN113092755A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110541625.9
申请日:2021-05-18
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/558 , G01N33/532
Abstract: 本发明涉及一种夹心法检测布鲁氏菌抗原的胶体金检测试纸条。所述该检测试纸条由布鲁氏菌抗原检测试纸条和塑料吸头组成,检测试纸条由PVC底板、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成。采用4株结合不同抗原表位的布鲁氏菌单克隆抗体夹心法,其中金标垫包被胶体金标记的布鲁氏菌单克隆抗体4D7,检测线包被布鲁氏菌单克隆抗体2B5,5F3,6C2混合液,质控线包被山羊抗鼠IgG抗体。本发明的布鲁氏菌抗原的检测试纸条能现场快速检测牛种、羊种、猪种布鲁氏菌,并有效排除小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157对布鲁氏菌抗原检测的干扰。试纸条灵敏度和敏感性高,特异性好,使用简便,适用于临床组织、环境、奶液等样本的检测,也适用于纯培养布鲁氏菌的鉴定。
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公开(公告)号:CN111549159A
公开(公告)日:2020-08-18
申请号:CN202010576699.1
申请日:2020-06-22
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种支原体通用PCR检测方法及其检测试剂盒。本发明选取16S rRNA序列V6高变区和V9高变区序列作为支原体特异性通用引物设计区域,在保证特异性的前提下,多处引入兼并碱基,设计并筛选获得MF20.1/MF20.2/MR21(序列1/序列2/序列3)作为支原体的通用PCR检测引物,能最大范围地检测各种支原体(鸡毒支原体、鸡滑液囊支原体、牛支原体、猪鼻支原体、猪肺炎支原体、衣阿华支原体等)。特异性检测结果表明,各种动物细胞(Vero细胞、SP-20细胞、Marc 145细胞等)、细菌(大肠杆菌、沙门氏菌等)均无特异性扩增条带。本发明PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,可用于细胞、病毒培养物、组织液、血清、兽用生物制品及人类疫苗及生物制品的支原体检测与检验。
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公开(公告)号:CN106834525B
公开(公告)日:2020-06-16
申请号:CN201710212194.5
申请日:2017-03-27
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法。所述的试剂盒包括多重PCR引物组、2×PCR核心试剂预混物(Premix Taq反应液)、阳性对照(禽结核参考菌株DNA)、阴性对照(ddH2O)和DL1000分子量标准溶液(Marker)。试剂盒的检测方法包括如下步骤:(1)提供疑试临床待测样品的DNA;(2)按常规PCR方法扩增样品DNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果,根据扩增条带结果进行判定。该法克服了传统诊断方法中的抗酸染色法敏感性差,生化试验方法程序多、时间长和普通单基因PCR法特异性差的缺点。具有方法特异、操作简便、灵敏度良好的优点,适合对临床疑似的家禽组织样本DNA直接鉴定。
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公开(公告)号:CN110013547A
公开(公告)日:2019-07-16
申请号:CN201910284617.3
申请日:2019-04-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株重组小反刍兽疫病毒H基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株,以蔗糖自杀质粒为载体,将含有特定启动子序列的小反刍兽疫病毒H基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中,成功构建了能够高效表达型重组小反刍兽疫病毒H基因的重组布鲁氏菌RA343-PPRV-H株。该重组菌株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性,对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性,而且该重组菌免疫动物后,能产生针对小反刍兽疫的特异性中和抗体,从而实现对小反刍兽疫的免疫保护。用该重组苗株制备的疫苗,免疫动物后能同时实现对布病和小反刍兽疫的双重免疫保护。
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公开(公告)号:CN110004100A
公开(公告)日:2019-07-12
申请号:CN201910284341.9
申请日:2019-04-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C12N1/21 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61K39/10 , A61P31/04 , A61P31/14 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及一株重组O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的粗糙型布鲁氏菌及其疫苗生产方法。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株,以蔗糖自杀质粒为载体,将含有特定启动子序列的O型口蹄疫病毒VP1基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中,成功构建了能够高效表达型FMDV VP1基因的重组布鲁氏菌RA343-VP1-FMDV-O株。该重组疫苗株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性,对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性,而且该重组菌免疫动物后,能产生针对FMDV VP1抗体,从而实现对FMD的免疫保护。该重组疫苗株按特定工艺开发成具有耐热保护特点的新型疫苗,免疫动物后能同时实现对布病和口蹄疫的双重免疫保护。
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公开(公告)号:CN106596958B
公开(公告)日:2018-07-20
申请号:CN201611177517.3
申请日:2016-12-19
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验(CF‑ELISA)诊断试剂盒,本试剂盒将补体结合试验(CFT)中的反应系统与酶联免疫吸附试验(ELISA)中的酶标记放大系统相结合。本试剂盒较传统补体结合试验诊断试剂而言,具有敏感性高、使用简便、快速、高通量,标准化程度高的特点,而较传统ELISA诊断试剂盒而言,具有特异性高、可检测各种布病特异性抗体的特点,是一种较为理想的新型布病诊断工具。本试剂盒主要组份:脂多糖LPS抗原包被板、强阳性对照血清、弱阳性对照血清、阴性对照血清、豚鼠补体、酶标记豚鼠补体C1q‑B单克隆抗体60G4、底物显色液、终止液、洗涤液。