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公开(公告)号:CN116814437A
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310743076.2
申请日:2023-06-21
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/11 , C12N15/79 , C07K14/165 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/90
Abstract: 本发明涉及弓形虫疫苗技术领域,具体涉及表达猫传染性腹膜炎病毒S1蛋白的弓形虫活疫苗及其构建方法与应用。本发明提供表达S1蛋白的弓形虫虫株,S1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。与原始虫株相比,表达S1蛋白的虫株的毒力没有显著变化,在小鼠体内致病性较高,但在猫体内几乎没有致病性,对猫具有较高的安全性。表达S1蛋白的虫株能够实现对弓形虫虫株的再次感染,以及提供对FIPV病毒感染的有效保护,具有阻止弓形虫卵囊排出,又能预防猫传染性腹膜炎病毒的潜力。
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公开(公告)号:CN109646674B
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN201910075001.5
申请日:2019-01-25
Applicant: 中国农业大学
IPC: A61K39/012 , A61P33/02
Abstract: 本发明涉及畜禽疫病防控技术领域,具体涉及一种球虫病活疫苗及其应用。本发明提供的疫苗包含球虫强毒株以及与之具有相同的寄生部位或在寄生生活史的任意一个或多个阶段具有相同的寄生部位的球虫弱毒株;所述疫苗中,所述球虫弱毒株和所述球虫强毒株的卵囊数量比例为50:1~3:1。本发明利用高剂量的弱致病性的球虫毒株对与其具有相同寄生部位的强致病性毒株产生竞争性占位优势,建立疫苗组分中共生病原的占位效应,降低强致病性毒株作为疫苗组分免疫后被再次过度摄入的繁殖力、致病作用和对宿主产生的损伤。本发明提供的球虫疫苗,能够在保证疫苗免疫效力的情况下,有效提高疫苗的安全性,减少药物防控成本,具备良好的应用潜力。
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公开(公告)号:CN111330001B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202010213328.7
申请日:2020-03-24
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及兽医寄生虫学及免疫生物学,具体涉及一种兔球虫病减毒活疫苗助悬剂及悬浮液。所述的兔球虫病减毒活疫苗助悬剂含有质量分数为0.15‑0.3‰的助悬复合剂,所述助悬复合剂由质量比为1:(0.8~1.2)的果胶和黄原胶组成。本发明中的兔球虫病减毒活疫苗助悬剂可实现通过饮水方式对兔进行免疫,此外,该助悬剂在常温下溶解速度快,可使兔球虫卵囊在水中形成均匀分散的体系,并保持6小时以上不发生下沉,保证了兔球虫病活疫苗免疫的均匀性,为兔球虫病减毒活疫苗在实际生产中的推广与应用提供了有力的技术支持。
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公开(公告)号:CN112176081B
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202011017981.2
申请日:2020-09-24
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及球虫耐药性检测技术领域,具体涉及与鸡球虫癸氧喹酯耐药性相关的SNP分子标记及其应用。本发明提供的SNP分子标记含有如SEQ ID NO.1所示序列第379位多态性为G/C的核苷酸序列。该SNP分子标记可用于区分鉴别癸氧喹酯敏感和耐药的鸡球虫,具有较高的癸氧喹酯耐药性检测准确性,检测结果与笼饲实验一致。本发明还提供SEQ ID NO.16‑17所示的该SNP分子标记的检测引物以及利用该引物结合PCR技术检测鸡球虫癸氧喹酯耐药性的方法。该方法具有检测耗时短、操作简单,检测成本低的优势,可广泛应用于鸡球虫癸氧喹酯耐药性的临床检测。
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公开(公告)号:CN107347873B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201710567585.9
申请日:2017-07-12
Applicant: 中国农业大学
Inventor: 索勋 , 刘贤勇 , 段春慧 , 索静霞 , 向碧琪 , 郝振凯 , 韩贞艳 , 毕菲菲 , 陶鸽如 , 李超 , 张思新 , 王超越 , 顾小龙 , 汤新明 , 胡丹丹 , 于咏兰
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明涉及一种艾美耳球虫冻存剂,所述冻存剂中包括冻存液和冷冻保护剂;所述冻存液中包括蔗糖、磷酸二氢钾、三水合磷酸氢二钾、L‑谷氨酸和小牛血清蛋白;所述冷冻保护剂为二甲基亚砜单体或包括二甲基亚砜的组合物。上述的冻存剂可分别制备成适用于孢子囊和卵囊冻存的冻存剂。采用本发明的冻存剂可将艾美耳球虫在液氮中长期进行保存,解决了艾美耳球虫需不断传代保种的不便。
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公开(公告)号:CN111607521A
公开(公告)日:2020-09-01
申请号:CN202010403481.6
申请日:2020-05-13
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及弓形虫疫苗技术领域,具体涉及缺失AP2IV-1基因的弓形虫弱毒活疫苗及其构建方法。本发明提供AP2IV-1基因缺失的弓形虫虫株,AP2IV-1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。与出发虫株相比,AP2IV-1基因缺失虫株的毒力显著降低,在小鼠体内几乎没有致病性,对宿主具有较高的安全性。AP2IV-1基因缺失虫株能够对不同类型的高剂量弓形虫急性和慢性再感染提供长期有效的免疫保护,具有成为预防动物弓形虫病的弱毒活疫苗的潜力。
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公开(公告)号:CN105087620B
公开(公告)日:2017-12-29
申请号:CN201510547191.8
申请日:2015-08-31
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/66 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种过表达猪共刺激受体4‑1BB载体及其应用。PCR扩增rosa26基因内含子1左右同源臂,4‑1BB调控序列,OCT4特异启动子;将同源左臂、4‑1BB表达框、含LoxP位点的Cre、Neo表达框、同源右臂、负筛选DTA依次连接,得到4‑1BB同源重组载体p4BOCNDR。将该载体与含特异性靶向猪rosa26基因内含子1的sgRNA的CRISPR/Cas9打靶载体共转入猪胎儿成纤维细胞中,以阳性细胞为供体细胞,卵母细胞为受体细胞,通过体细胞核移植技术获得克隆胚胎;将克隆胚胎移入猪子宫内妊娠获得在rosa26基因第一内含子定点整合有4‑1BB基因且自动删除标记基因的转基因猪。
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公开(公告)号:CN106635980A
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201611022238.X
申请日:2016-11-16
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及生物细胞系,具体公开了一种自发永生化的绵羊外周血来源细胞系及其建立方法。具体为,采集成年健康绵羊的外周血,利用人外周血淋巴细胞分离液分离细胞后,进行细胞的培养与传代,传代过程中,通过对消化步骤的优化以及对培养基的优化,获得一种均一性高的自发永生化的绵羊外周血来源细胞系,该细胞系可表达绵羊的多种先天免疫受体,可用于细胞生物学、病原与宿主相互作用的体外研究。为促进绵羊健康养殖及疫病防控提供了很好的细胞学工具,为体外研究病原与绵羊的相互作用、评估药物或生物制品对绵羊的影响,更好的服务绵羊的健康养殖。
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公开(公告)号:CN105087620A
公开(公告)日:2015-11-25
申请号:CN201510547191.8
申请日:2015-08-31
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/66 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供了一种过表达猪共刺激受体4-1BB载体及其应用。PCR扩增rosa26基因内含子1左右同源臂,4-1BB调控序列,OCT4特异启动子;将同源左臂、4-1BB表达框、含LoxP位点的Cre、Neo表达框、同源右臂、负筛选DTA依次连接,得到4-1BB同源重组载体p4BOCNDR。将该载体与含特异性靶向猪rosa26基因内含子1的sgRNA的CRISPR/Cas9打靶载体共转入猪胎儿成纤维细胞中,以阳性细胞为供体细胞,卵母细胞为受体细胞,通过体细胞核移植技术获得克隆胚胎;将克隆胚胎移入猪子宫内妊娠获得在rosa26基因第一内含子定点整合有4-1BB基因且自动删除标记基因的转基因猪。
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公开(公告)号:CN102657865A
公开(公告)日:2012-09-12
申请号:CN201210134113.1
申请日:2012-04-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供利用转基因球虫向哺乳动物肠道靶向运送蛋白或抗原的方法,其是以球虫作为靶向运送蛋白或抗原的载体,通过对球虫进行转基因操作,使外源蛋白或抗原表达于球虫的孢子囊腔。本发明提供了一种转基因球虫的新用途,利用球虫的分泌型信号肽将外源蛋白打靶到球虫的孢子囊腔,卵囊在胃中因胃的机械蠕动作用破裂释放孢子囊,孢子囊在小肠中因胆汁和胰酶的消化作用破囊释放子孢子,孢子囊中的蛋白随之释放到肠道,避免了胃液对蛋白的变性降解作用,从而使孢子囊中的蛋白直接和肠道粘膜接触,达到激发肠道免疫应答或治疗肠道疾病的目的。本发明使用的球虫种属特异性强,生物安全性高,可以靶向肠道释放外源蛋白,适于口服应用,操作简单,应用前景广阔。
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