公开(公告)号：CN110713989A

公开(公告)日：2020-01-21

申请号：CN201911161596.2

申请日：2019-11-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 谢青梅 ,  封柯宇 ,  符军 ,  邵冠明 ,  张新珩

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明提供了一种快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法，所述方法是以传染性支气管炎病毒H120疫苗株的感染性克隆为骨架载体，再将骨架载体中的抗原基因置换为传染性支气管炎流行毒株的目的抗原基因，从而获得重组支气管炎病毒的方法，所述目的抗原基因是不同血清型/基因型的传染性支气管炎流行毒株的S基因片段嵌合而成；所述置换还可以是目的抗原基因与N基因同时置换，置换时均需保留骨架载体中原有的S1基因的信号肽区域。其有益效果在于，本发明所述快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法，操作方法简单易行，重复性高，传代稳定性好，能快速高效的应对频繁变异的IBV流行，并且所述方法为载体疫苗的构建提供新思路。

公开(公告)号：CN110079541A

公开(公告)日：2019-08-02

申请号：CN201910373562.3

申请日：2019-05-05

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 谢青梅 ,  封柯宇 ,  邵冠明 ,  张新珩 ,  邵洋洋

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/86 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用，首先是获得覆盖所选冠状病毒全长基因组的cDNA小片段，然后进行分段克隆，再使用RED/ET重组技术将含有冠状病毒全长基因组的cDNA小片段组装到质粒载体上，筛选获得含有该冠状病毒全长cDNA的感染性克隆。其有益效果在于，本发明首次利用中低拷贝的质粒载体成功构建了鸡传染性支气管炎病毒感染性克隆，为冠状病毒的感染性克隆的构建开辟了新途径，该方法解决了冠状病毒载体选择困难和病毒大基因组在细菌中不稳定的问题，阳性克隆率高，且获得的反向遗传疫苗株克隆具有完整性、传代稳定性和感染性，拯救效率高，为研究冠状病毒的致病机理和开发新型疫苗等提供了有效工具。