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公开(公告)号:CN111424118A
公开(公告)日:2020-07-17
申请号:CN202010332050.5
申请日:2020-04-24
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法,包括以下步骤:提取样本总RNA;设计用于扩增西番莲中重要病毒病原黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒基因片段的特异性引物;在无RNA酶的PCR管中加入提取的西番莲植物总RNA样品1~3μg高温变性获得病毒RNA作为模板进行逆转录反应合成cDNA第一链;利用单管多重PCR扩增反应得到PCR扩增产物;将获得的PCR扩增产物进行2.0%琼脂糖凝胶电泳检测。本发明应用黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒特异引物可以同时在单PCR管中检测4种西番莲主要病毒,特异性、简便性、灵敏度和准确性较单一病毒或两种病毒检测有较大的优势。
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公开(公告)号:CN109929812A
公开(公告)日:2019-06-25
申请号:CN201910116031.6
申请日:2019-02-15
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种马铃薯品种合作88中马铃薯A病毒毒株及其构建方法与应用。所述的马铃薯品种合作88中马铃薯A病毒毒株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日:2018年12月14日,保藏编号:CGMCC No.16990。马铃薯品种合作88中马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)毒株建立包括样品采集;病原鉴定;合作88品种中单一马铃薯A病毒组培苗建立以及应用。所述的样品采集包括病害调查、样品采集、保存;所述的建立包括通过带毒薯块幼芽在培养基中诱导为组培苗、在一定温度条件下保存该带有PVA合作88品种组培苗;应用为所述的马铃薯品种合作88中马铃薯A病毒毒株在检测中的应用。
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公开(公告)号:CN109929811A
公开(公告)日:2019-06-25
申请号:CN201910116023.1
申请日:2019-02-15
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种马铃薯品种中甸红中马铃薯X病毒毒株及其构建方法与应用。所述的马铃薯品种中甸红中马铃薯X病毒毒株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日:2018年11月26日,保藏编号:CGMCC No.16891。马铃薯品种中甸红中马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)毒株建立包括样品采集;病原鉴定;中甸红品种中单一马铃薯卷叶病毒组培苗建立以及应用。所述的样品采集包括病害调查、样品采集、保存;包括通过带毒薯块幼芽在培养基中诱导为组培苗、在一定温度条件下保存该带有PVX中甸红品种组培苗;应用为所述的马铃薯品种中甸红中马铃薯X病毒毒株在检测中的应用。
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公开(公告)号:CN105548544A
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201610077299.X
申请日:2016-02-04
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种朱顶红褪绿环斑病毒检测试剂盒及其检测方法与应用。朱顶红褪绿环斑病毒检测试剂盒包括盒体、硝酸纤维素膜、显色液试剂瓶、抗体试剂瓶、对照试剂瓶;所述的显色液试剂瓶包括显色试剂瓶A和显色液试剂瓶B;所述的抗体试剂瓶包括一抗试剂瓶和二抗试剂瓶;所述的对照试剂瓶包括HCRV标准阳性对照试剂瓶和HCRV标准阴性对照试剂瓶。应用为所述的朱顶红褪绿环斑病毒检测试剂盒在检测朱顶红褪绿环斑病毒中的应用。
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公开(公告)号:CN105548543A
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201610077250.4
申请日:2016-02-04
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种花生黄色斑点病毒检测试剂盒及其检测方法与应用。花生黄色斑点病毒检测试剂盒包括盒体、硝酸纤维素膜、显色液试剂瓶、抗体试剂瓶、对照试剂瓶;所述的显色液试剂瓶包括显色试剂瓶A和显色液试剂瓶B;所述的抗体试剂瓶包括一抗试剂瓶和二抗试剂瓶;所述的对照试剂瓶包括GYSV标准阳性对照试剂瓶和GYSV标准阴性对照试剂瓶。应用为所述的花生黄色斑点病毒检测试剂盒在检测花生黄色斑点病毒中的应用。
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公开(公告)号:CN101974654A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010519281.3
申请日:2010-10-26
Applicant: 云南省烟草公司昭通市公司 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 , 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明是一种马铃薯Y病毒烟草分离物不同株系的检测方法。通过马铃薯Y病毒特异性抗体诱捕病株样品中的马铃薯Y病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用马铃薯Y病毒不同株系外壳蛋白基因简并引物进行一步法反转录聚合酶链式反应(one stepRT-PCR)、利用限制性内切酶EcoR V对PCR产物进行酶切,琼脂糖凝胶电泳检测目的片段。该方法将快速、特异和高灵敏度的免疫捕捉RT-PCR与快捷的PCR产物酶切鉴定,从而快速、简便的检测马铃薯Y病毒烟草分离物不同株系。
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公开(公告)号:CN119876259A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510085223.0
申请日:2025-01-20
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种番茄抗病毒相关基因AGO2a在抗病毒中的应用,涉及基因工程技术领域。本发明提供的AGO2a核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,本申请首次公开了番茄AGO2a基因的过表达可有效抑制病毒的侵染,可以抑制病毒DNA在植物体内的积累,提高番茄对番茄黄化曲叶病毒的抗性。同时本发明还提供了一种具有番茄黄化曲叶病毒抗性的番茄转基因株系的制备方法,所制备的转基因株系在番茄种植领域具有显著的应用价值。
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公开(公告)号:CN112913575A
公开(公告)日:2021-06-08
申请号:CN202110241536.2
申请日:2021-03-04
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: A01G18/00
Abstract: 本发明公开了一种灵芝小孔开袋覆土种植方法,包括如下步骤:S1、选择适宜灵芝种植的林下或设施棚作为种植场地,开挖种植槽,或者在土壤表面打出若干种植穴,然后在种植槽或种植穴表面撒少量熟石灰粉;S2、在灵芝菌棒的上端棒肩处剪去直径1‑3厘米的菌袋塑料,开出小孔;S3、将开小孔的灵芝菌棒轻轻移入种植槽或种植穴内,开孔端向上;S4、在种植槽或种植穴上覆土,覆土盖过灵芝菌棒的上端,即完成灵芝小孔开袋覆土种植。本发明原理简单,菌棒污染低,出菇快,出菇率高,种植户易学,容易接受,便于推广,应用前景广阔,可明显提高种植效益和林地经济效益。
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公开(公告)号:CN103740865B
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201410034604.8
申请日:2014-01-25
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种烟草花叶型病株中烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒3种病毒的检测方法。通过烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒特异性混合抗体诱捕病样中病毒,不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应,专门针对烟草生产过程对烟草中上部叶片为害较为严重且不能从症状区分病原而建立的一种单管同时检测3种病毒中的1、2或3种不同病毒组合的方法,检测时间仅需5小时。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合,同时设置健康烟草随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照,从而快速、准确、灵敏的检测田间烟草植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等。
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公开(公告)号:CN102352418B
公开(公告)日:2014-04-30
申请号:CN201110350853.4
申请日:2011-11-09
Applicant: 云南省烟草公司昭通市公司 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 , 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明提供了一种快速检测马铃薯Y病毒烟草分离物的方法,其步骤包括通过马铃薯Y病毒烟草分离物特异性抗体诱捕病株样品中的马铃薯Y病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用马铃薯Y病毒外壳蛋白基因3′末端引物及四条特异反应引物进行一步法反转录环介导等温扩增(Reverse-transcription?Loop-Mediated?Isothermal?Amplification,RT-LAMP)法扩增,肉眼观察或浊度仪在400nm波长下检测沉淀浊度或电泳条带观察,判断样品中是否带有病毒。该方法将快速、特异和高灵敏度的病毒免疫捕捉与快捷的RT-LAMP法结合,从而快速、简便的检测烟草样品中的马铃薯Y病毒。
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