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公开(公告)号：CN102634509B
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201210126926.6
申请日：2012-04-27
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种直接从感病小麦叶片上高效快速提取小麦条锈菌DNA的方法，其特征在于，吸取20μl配好的20％的chelex-100混悬液于100μl PCR管中，吸取5μl的Chelex-100上清液于长有小麦条锈菌夏孢子小麦叶片上，并在滴有Chelex-100上清液的病斑处反复涂抹叶片多次，将锈孢子洗下后，吸回叶片上含有锈孢子的Chelex-100上清液并加入到装有20μl 20％chelex-100混悬液的PCR管中，用移液器反复吸取混匀，放入沸水浴中水浴2min，再放到旋涡混合器上振荡混匀10s，水浴5min后保存于-20℃备用，上清液均可作为PCR的模板。建立一套高效、快速、可直接从感小麦条锈病菌的植株上提取小麦条锈病菌DNA作为PCR扩增模板的方法。
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公开(公告)号：CN103175810A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201210554731.1
申请日：2012-12-05
Applicant: 云南农业大学
CPC classification number: G01N21/6458
Abstract: 本发明公开了一种观测融合蛋白长距离转运至水稻叶芽的方法，该方法将GFP融合蛋白处理水稻根尖后，处理过根尖的水稻植株叶芽进行冷冻切片，切片后PI荧光染料进行染色，共聚焦显微镜直接观测GFP融合蛋白从水稻根尖转运至叶芽。该方法利用GFP融合蛋白处理水稻根尖0.5cm处，叶芽被冷冻切片后PI染色，共聚焦显微镜观测GFP融合蛋白从水稻根尖转运至叶芽，能直接定性地了解GFP融合蛋白在水稻植株内的长距离转运情况。GFP融合蛋白直接处理水稻根尖0.5cm处，共聚焦显微镜观测GFP融合蛋白转运至叶芽可为进一步开展效应蛋白能引起水稻系统防御反应提供非常强有力的证据。该方法简便、准确、快速。
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公开(公告)号：CN103070052A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201310043582.7
申请日：2013-02-05
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开一种水稻休眠芽繁育再生植株的方法，属于作物育种技术领域。该方法取水稻带有倒1～倒3节点休眠芽的稻杆散播在育苗床上并覆土，或将所述的稻杆用植物激素浸泡，再散播在育苗床上并覆土，按水稻常规苗床育秧方法进行育苗和管理，待再生苗3叶～4叶期移栽大田。该方法能有效保存和繁殖获得大量特殊水稻材料如雌性不育、雄性不育等，解决了特殊材料不易繁殖的难题；直接利用杂种F1即可获得大量F1再生植株，有效降低水稻杂交制种成本和缩短育种周期，还能很好地保持其杂种优势；该方法用水稻地上部分带有倒1～倒3节点休眠芽稻杆用激素处理和不用激素处理的再生效率都极显著优于用稻桩直接再生，其方法简单易实施，便于推广应用。
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公开(公告)号：CN103013670A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201310012407.1
申请日：2013-01-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种用微波辅助提取的紫茎泽兰挥发油，属天然植物提取产物技术领域。本发明的紫茎泽兰挥发油经如下步骤得到：将紫茎泽兰地上部分粉碎物置于玻璃蒸馏瓶中，加入重量为1～10倍的蒸馏水浸泡0.1～8小时，把蒸馏瓶置于工作频率为915兆赫兹（MHZ）或2450兆赫兹（MHZ），工作功率为50～3000瓦（W）的微波提取器中连续提取5～200分钟（min），将馏出液用10～100毫升（mL）乙醚或正己烷萃取1～3次，合并乙醚或正己烷萃取液后用1～25克（g）无水硫酸钠脱水，20～70℃减压挥除乙醚或正己烷，即制得紫茎泽兰挥发油。本发明的有益效果在于：利用微波辅助方法紫茎泽兰挥发油，且挥发油的得率显著高于传统的水蒸气蒸馏提取法。
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公开(公告)号：CN102986430A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210499695.3
申请日：2012-11-18
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种反季马铃薯机械化种植配套栽培技术，包括以下步骤：1)选地，整地选择PH5.3-PH7的微酸性、地势较高、土质疏松肥沃、土层深厚、能排能灌的壤土或砂壤土地块；2)种子准备播种的薯块在45-70g，每个播种块含有2-3个芽眼，切块时必须对切刀进行消毒；3)播种播种从块茎上部到垄台上部的深度为8-10cm，垄距90cm，株距为18cm；4)中耕当出苗达60％时后，覆土5cm；5)肥料管理；6)水分管理马铃薯根系达60cm，测定土壤深度为45cm以了解土壤深度的供水能力，块茎形成和膨大期田间可利用水必须保持70-80％；8)病虫害防治；9)收获。本发明具有提高产量和质量的特点，适合广泛应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102839148A
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201210323198.8
申请日：2012-08-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种以芹菜为原料制作适宜恶疫霉菌产生孢子囊的液体培养基，具体制作方法为，芹菜去叶洗净切碎后按w//v为1∶1的比例加入去离子水于榨汁机中榨汁，将所得芹菜汁用四层纱布过滤后用含0.02％(w/v)CaCO3的去离子水稀释至含芹菜汁10％～50％(v/v)，分装后以0.103MPa、121℃、高压蒸气灭菌20min；将灭菌液体培养基倒入灭菌的9cm直径培养皿中，每皿倒15ml。该培养基原材料成本低廉且容易获取，培养基的制作和孢子囊产生的程序简单易学，大大提高了恶疫霉菌孢子囊产生的效率，为病原菌接种体的制备提供了极大的便利。
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公开(公告)号：CN101654703B
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN200910094987.7
申请日：2009-09-18
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种水稻雌性不育基因FST分子鉴定的方法，属于农业生物技术领域育种领域。本发明的技术方案是提取水稻总DNA，用特异性引物Gf1、Gr1、Jf1及Jr1进行PCR反应；加入3μl的loading buffer混匀上样6μl，用2％琼脂糖凝胶、1×TAE buffer、125V电泳40min；紫外透射仪上检测，依据电泳结果鉴定材料基因型。基因型为野生型的PCR产物分子量为395bp及663bp；突变型(雌性不育)的PCR产物分子量为298bp及655bp；杂合型的PCR产物分子量为298bp、395bp及663bp(或655bp)。本发明的效果用途能快速、有效鉴别水稻雌性不育基因FST。
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公开(公告)号：CN101658129A
公开(公告)日：2010-03-03
申请号：CN200910094988.1
申请日：2009-09-18
Applicant: 云南农业大学
IPC: A01H1/02 , A01H1/04 , C12N15/29 , C07K14/415
Abstract: 本发明涉及一种雌性不育基因FST用于杂交水稻育种的方法，属于农业生物技术领域中的育种领域。本发明的技术方案是依照三系或两系法程序繁殖雄性不育系；水稻雌性不育系的繁殖可采用多年生宿根无性繁殖方式完成，或培育条件表达两用型的转基因雌性不育系，通过人工调控FST基因表达使雌性育性恢复，完成自身繁殖；制种时将雄性不育系及雌性不育系种植在同一田块中，花粉受体是雄性不育系，花粉供体是雌性不育系，雌性不育系花粉授给雄性不育系，收获种子为杂交种。本发明同时利用雄性不育(MS)和雌性不育(FS)，构建“MS+FS”的制种模式，适宜机械化操作，杜绝了恢复系机械混杂，能加速杂交水稻的推广应用进程。
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公开(公告)号：CN100589691C
公开(公告)日：2010-02-17
申请号：CN200510048763.4
申请日：2005-12-27
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种玉米与甘薯多样性种植控制玉米大斑病和玉米小斑病的方法，属植物保护领域。本发明的技术方案是保持目前玉米和甘薯的栽培方式，玉米与玉米之间，甘薯与甘薯之间的株距、行距和密度与常规栽培方法相同，地块开墒与常规相同，在同一田块中按不同比例进行玉米和甘薯的带状间作，玉米种植2～10行，甘薯种植2～6行，玉米与相邻甘薯的行距为20～45cm。本发明对玉米大斑病和玉米小斑病均有较好的控制效果，能够大幅度减少化学农药的使用量，增加单位面积的产量，有显著的经济、社会、生态效益和广阔的应用前景。
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