公开(公告)号：CN108207634A

公开(公告)日：2018-06-29

申请号：CN201810156210.8

申请日：2018-02-24

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 付玉杰 ,  牛丽丽 ,  焦骄 ,  盖庆岩 ,  秦启萍 ,  王微 ,  王慧梅

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明涉及一种银香菊茎段组织培养快繁体系建立的方法，属于生物技术领域植物组织培养范畴。包括以下几个步骤：(1)外植体的选取与灭菌；(2)愈伤组织的诱导；(3)丛生芽的分化与增殖；(4)生根培养；(5)银香菊再生植株炼苗与移栽。本方法采用银香菊茎段为外植体，通过调节MS培养基中特定激素的种类与浓度，成功建立了银香菊组织培养快繁体系。该方法获得外植体容易，组培操作简单，具有培养周期短，繁殖系数高等特点，为进一步实现工业化生产奠定基础。

公开(公告)号：CN106902095A

公开(公告)日：2017-06-30

申请号：CN201710133313.8

申请日：2017-03-08

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 王慧梅 ,  王连艳 ,  韩淑兰 ,  张贵锋 ,  杨婷媛

IPC: A61K9/51 ,  A61K47/34 ,  A61K31/7048 ,  A61K39/39 ,  A61P35/00

CPC classification number: A61K9/5153 ,  A61K31/7048 ,  A61K39/39 ,  A61K2039/55511

Abstract: 本发明提供了一种集化疗与免疫疗法为一体的纳米制剂及制备方法。本发明采用超声乳化法结合溶剂挥发法制得装载黄芩苷的聚乳酸纳米制剂；通过优化超声强度和时间，调节内水相和油相的比例，所制得的聚乳酸纳米制剂具有粒径小且均一，分散性好等优点。本发明所述的载黄芩苷聚乳酸纳米制剂具有活化抗原提呈细胞和杀伤黑色素肿瘤细胞的双重功能，为化疗与免疫疗法相结合的新型治疗肿瘤的方法奠定了基础。

公开(公告)号：CN104017822A

公开(公告)日：2014-09-03

申请号：CN201310190956.8

申请日：2013-05-22

Applicant: 东北林业大学 ,  王慧梅

Inventor： 王慧梅 ,  付玉杰 ,  王文杰 ,  祖元刚 ,  曲丹 ,  任洁

IPC: C12N15/84 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明提供一种利用木豆无菌苗叶片进行外植体转化，建立木豆毛状根培养体系方法。本发明采用叶片为外植体,建立毛状根培养体系：叶片在1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L的培养基上预培养两天后进行菌液侵染，菌液浓度OD600为0.6-0.8，侵染5-10min后转入1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L培养基上共培养3天，然后转入抑菌培养基1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+400mg/L羧苄青霉素，约一周左右便可形成毛状根。PCR检测证明外源基因已经转入到木豆毛状根中，转化率为60%。转化后毛状根在无激素培养基上生长速度非常快，一个月能增殖7-8倍。次生代谢产物含量高，芹菜素和染料木素含量分别为0.58mg/g(DW)和1.32mg/g(DW)，显著高于实生苗根中含量。本发明提供的培养简单、再生周期短、可持续获得木豆毛状根方法，可用于规模化培养木豆毛状根来提取有价值次生代谢产物，具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN103383335A

公开(公告)日：2013-11-06

申请号：CN201310239703.5

申请日：2013-06-18

Applicant: 东北林业大学 ,  王文杰

Inventor： 王文杰 ,  李艳红 ,  王琼 ,  祖元刚 ,  王慧梅 ,  任洁 ,  仲召亮 ,  裴忠雪

IPC: G01N15/02 ,  G01Q60/24 ,  G01N23/22 ,  G01N23/20 ,  G01N21/25

Abstract: 一种测定外生菌根真菌影响土壤胶体表面特征与组成的方法，首先制备真菌菌液和土壤胶体溶液，然后取4ml土壤胶体溶液与10μl真菌菌液反应，做成不同的样品，进行激光粒度仪、原子力显微镜、扫描电镜、X射线衍射、红外光谱、X射线光电子能谱的分析。通过激光粒度仪观察土壤胶体粒径大小及分布的变化，原子力显微镜和扫描电镜观察土壤胶体表面特征的变化，X射线衍射辨认土壤的矿物组成，并分析各矿物质晶粒尺寸和相对结晶度的变化，红外光谱和X射线光电子能谱来研究土壤官能团及有机元素组成的变化。通过以上分析方法探究真菌对土壤胶体表面结构特征、矿物组成和有机组成的影响，旨为揭示真菌影响土壤的深层机理提供技术支持。

公开(公告)号：CN1334003A

公开(公告)日：2002-02-06

申请号：CN00134313.0

申请日：2000-12-13

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 祖元刚 ,  孔瑾 ,  王慧梅 ,  聂明珠 ,  石福臣 ,  谷会岩 ,  杨逢建 ,  张宝友

IPC: A01H4/00

Abstract: 一种从白桦的叶片诱导不定芽的培养基,由硝酸钾、硝酸铵、七水硫酸镁、二水氯化钙、磷酸二氢钾、四水硫酸锰、七水硫酸锌、硼酸、五水硫酸铜、碘化钾、二水钼酸钠、乙二胺四乙酸二铁、六水氯化钴、烟酸、肌醇、盐酸硫胺、盐酸吡哆醇、琼脂、蔗糖组成MSB5培养基的基础上还增加6－BA、NAA及IBA。本发明培养基诱导率高,增殖率高,可以在较短的时间内得到大量的再生苗,建立优良的再生体系,并为根癌农杆菌的转化提供了保障。

公开(公告)号：CN103323577A

公开(公告)日：2013-09-25

申请号：CN201310239702.0

申请日：2013-06-18

Applicant: 东北林业大学 ,  王文杰

Inventor： 王文杰 ,  李艳红 ,  王琼 ,  祖元刚 ,  王慧梅 ,  汲常萍 ,  裴忠雪 ,  仲召亮 ,  任洁

IPC: G01N33/24 ,  G01N15/02 ,  G01N23/20 ,  G01N23/227 ,  G01N21/35

Abstract: 本发明提供了一种测定水解聚马来酸酐（HPMA）影响土壤胶体颗粒表面特征及组成的方法。首先提取土壤胶体，制备土壤胶体溶液，取5ml土壤胶体溶液与2μl HPMA反应，制备不同的样品，进行扫描电镜、原子力显微镜、激光粒度仪、X射线衍射、X射线光电子能谱及红外光谱的观测。扫描电镜和原子力显微镜主要观察土壤胶体表面特征的变化；激光粒度仪观察土壤胶体颗粒大小及分布的变化，X射线衍射辨别土壤的矿物组成，并分析各矿物质结晶度的变化，X射线光电子能谱和红外光谱主要研究土壤胶体元素组成及各官能团的变化。以上技术方法可以综合反映HPMA对土壤胶体表面结构特征、矿物组成和有机组成的影响，旨为揭示HPMA改良土壤的深层机理提供技术支持。

公开(公告)号：CN102613084A

公开(公告)日：2012-08-01

申请号：CN201210099444.6

申请日：2012-04-06

Applicant: 东北林业大学 ,  王慧梅

Inventor： 王慧梅 ,  王文杰 ,  陈亚杰 ,  于海娣 ,  祖元刚

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明提供了一种利用愈伤组织再生途径快速繁殖黄檗的方法。本发明采用黄檗无菌苗茎段为外植体，培养在MS+BA1.5mg/l+NAA0.5mg/l+葡萄糖20g/l+琼脂6.0g/l的培养基上，愈伤组织诱导率为100％，愈伤组织不定芽发生率可达75.4％，每个外植体平均再生不定芽数为14.7。将再生的不定芽继续在继代增殖培养基MS+BA0.5mg/l+蔗糖20g/l+琼脂6.0g/l上培养，一个月后增殖倍数平均为3.4。将再生苗在1/4MS+IBA0.8mg/l+蔗糖20g/l+琼脂6.0g/l的培养基上进行生根培养，不定根的发生频率为90.6％，平均再生的不定根数为4.3。对生长健壮的再生苗进行移栽，移栽成活率为100％。本发明中黄檗离体茎段不定芽发生的再生系统具有高频性和可重复性，培养周期短，为黄檗组织培养快速繁殖及利用基因工程改良黄檗打下了很好基础。