公开(公告)号：CN108004265B

公开(公告)日：2020-05-12

申请号：CN201711183968.2

申请日：2017-11-23

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 施艳 ,  孙虎 ,  陈琳琳 ,  王振跃 ,  李洪连 ,  孙炳剑

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  C07K14/415 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明涉及基因工程领域，特别是指一种与瓜类褪绿黄化病毒沉默抑制子蛋白互作的蛋白及其应用。所述蛋白为SKP1，其蛋白序列如SEQ ID NO：2所示。所述SKP1的基因序列如SEQ ID NO：1所示。所述的与瓜类褪绿黄化病毒沉默抑制子蛋白互作的蛋白作为沉默抑制子P22蛋白的应用，步骤为：根据Skp1基因的全长，设计引物对如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示；构建Skp1基因的重组表达载体；将重组表达载体通过农杆菌转化法转染瓜类植株。该蛋白与P22的互作与P22对GFP的沉默抑制作用直接相关，P22不能与SKP1互作的突变体对GFP的沉默抑制作用显著减弱。

公开(公告)号：CN108004265A

公开(公告)日：2018-05-08

申请号：CN201711183968.2

申请日：2017-11-23

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 施艳 ,  孙虎 ,  陈琳琳 ,  王振跃 ,  李洪连 ,  孙炳剑

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  C07K14/415 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明涉及基因工程领域，特别是指一种与瓜类褪绿黄化病毒沉默抑制子蛋白互作的蛋白及其应用。所述蛋白为SKP1，其蛋白序列如SEQ ID NO：2所示。所述SKP1的基因序列如SEQ ID NO：1所示。所述的与瓜类褪绿黄化病毒沉默抑制子蛋白互作的蛋白作为沉默抑制子P22蛋白的应用，步骤为：根据Skp1基因的全长，设计引物对如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示；构建Skp1基因的重组表达载体；将重组表达载体通过农杆菌转化法转染瓜类植株。该蛋白与P22的互作与P22对GFP的沉默抑制作用直接相关，P22不能与SKP1互作的突变体对GFP的沉默抑制作用显著减弱。

公开(公告)号：CN103421839B

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201310313045.X

申请日：2013-07-24

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 施艳 ,  王振跃 ,  孙虎 ,  孙炳剑 ,  潘正茂 ,  范志业

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明涉及一种瓜类褪绿黄化病毒侵染性载体的构建方法。以瓜类褪绿黄化病毒为材料对基因组RNA1和RNA2进行了侵染性克隆的构建，将8.6KbRNA1和8KbRNA2分别构建在高效的植物表达载体pCB301M上，重组载体通过氯化钙转化的方法转入农杆菌菌株，获得以农杆菌介导的对寄主植物具有高效侵染能力的病毒载体。本发明为研究病毒基因组结构与功能及其与寄主之间的互作研究、为外源蛋白的表达和植物基因组功能研究提供了成熟的方法和体系。