一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN114231664B

    公开(公告)日:2023-07-28

    申请号:CN202111446874.6

    申请日:2021-11-30

    Abstract: 本发明提供一种赤点斑石斑鱼神经坏死病毒RGNNV检测试剂盒及其检测方法,包括RGNNV引物组,所述引物组包括正向引物和反向引物,正向引物序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物序列如SEQ ID NO.2所示;还包括在正向引物前段加上T7启动子序列,所述T7启动子序列如SEQ ID NO.3所示,得到添加了T7启动子序列的正向引物序列如SEQ ID NO.4所示。本发明检测方法,包括以下步骤:S1.RGNNV病毒RNA的提取、病毒RNA逆转录、核酸扩增、体外转录;S2.CRISPR‑Cas13a检测体系的建立;S3.将待测样品RNA添加到步骤S2得到的混合物中;S4.检测荧光值。本发明检测方法特异性好、灵敏度高、重复性好,准确度高,可快速地检测RGNNV检测成本低,具有较高的应用价值和推广前景。

    一种石斑鱼精巢人工催熟的方法
    13.
    发明公开

    公开(公告)号:CN112011569A

    公开(公告)日:2020-12-01

    申请号:CN202010977029.0

    申请日:2020-09-16

    Abstract: 本发明公开了一种石斑鱼精巢人工催熟的方法,其包括以下步骤:构建Dmrt1基因真核表达载体;采用脂质体包埋构建好的Dmrt1真核表达载体;在繁殖季节选择不能产生精液的雄性石斑鱼;在石斑鱼腹部开微孔,采用微量注射器将脂质体包埋的Dmrt1真核表达载体直接注射入精巢;注射完放入水泥池饲养,按时投喂高蛋白饵料。本发明构建了Dmrt1真核表达载体,转化到大肠杆菌中培养,可获得大量带dmrt1基因的重组表达载体;再通过脂质体包埋载体后注射到石斑鱼精巢中,直接促进精巢的成熟,具有准确性高,催熟效率高,适用范围广的优点。

    一种基于Crispr/Cas12a系统检测入侵物种的试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN117248032A

    公开(公告)日:2023-12-19

    申请号:CN202311053311.X

    申请日:2023-08-21

    Abstract: 本发明公开了一种基于Crispr/Cas12a系统检测入侵物种的试剂盒,所述试剂盒包括CRISPR‑Cas12a检测体系和含有靶标的目的片段;其中所述CRISPR‑Cas12a检测体系包括Cas12a蛋白、入侵物种的特异性gRNA、淬灭荧光DNA报告探针、检测缓冲液和ddH2O,所述含有靶标的目的片段采用引物扩增获得。还公开了上述利用上述试剂盒检测入侵物种的方法,以及上述试剂盒在制备检测入侵物种产品中的应用。本发明检测试剂盒及方法设计了入侵物种特异性gRNA,可与入侵物种的保守序列特异性形成互补双链,与其他入侵物种不存在交叉反应,提高了入侵物种检测的特异性。

    检测石斑鱼抗神经坏死病毒性状相关的SNP分子标记组合的试剂

    公开(公告)号:CN115896309A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202211491305.8

    申请日:2020-12-21

    Abstract: 本申请是申请日为2020年12月21日、申请号202011520740X,发明名称为“检测石斑鱼抗神经坏死病毒性状相关的SNP分子标记组合的试剂”的发明专利申请的分案申请。本发明公开了检测石斑鱼抗神经坏死病毒性状相关的SNP分子标记组合的试剂,在本发明发现5个与赤点石斑鱼抗神经坏死病毒性状相关的SNP位点,当SNP位点1基因型为GG、SNP位点2基因型为AC、SNP位点3基因型为CC、SNP位点4基因型为TA、SNP位点5基因型为TT,赤点石斑鱼感染神经坏死病毒后的死亡概率要显著低于其他基因型的个体。通过检测赤点石斑鱼上述SNPs,能够有效地确定其是否具有神经坏死病毒抗感性状。

    一种用于五种石斑鱼的分子鉴别引物、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN111607651B

    公开(公告)日:2022-07-08

    申请号:CN202010450619.8

    申请日:2020-05-25

    Abstract: 本发明公开了一种用于五种石斑鱼的分子鉴别引物、试剂盒及方法。本发明首先提供了一种用于五种石斑鱼的分子鉴别引物,所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示;所述五种石斑鱼为云龙杂交斑、虎龙杂交斑、红龙杂交斑、赤点石斑鱼或斜带石斑鱼中的任意一种或几种。利用该引物,采用线粒体基因组DNA条形码与限制性核酸内切酶技术相结合的方法能够快速、有效的对五种石斑鱼进行鉴别,其反应稳定、重复性好;与传统的形态学鉴定相比,该方法具有检测准确性高、客观性强的特点;与单纯的线粒体基因组DNA条形码测序鉴定方法相比,该方法具有直观性强、判断简易的特点;因此,本发明提供的引物在鉴别五种石斑鱼或制备用于鉴别五种石斑鱼的试剂盒中具有广泛的应用前景。

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