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公开(公告)号：CN115323075B
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202210778469.2
申请日：2022-06-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种检测鸡传染性支气管炎病毒及基因分型的RT‑RAA引物探针组、试剂盒及其应用，属于分子生物学技术领域。本发明提供的RT‑RAA引物探针组，包括Vi引物探针组和By引物探针组中的至少一组；其中Vi引物探针组中Vi引物的正、反引物、Vi探针的核苷酸序列分别如SEQIDNO.1‑3所示；By引物探针组中By引物的正、反引物、By探针的核苷酸序列分别如SEQIDNO.4‑6所示。本发明提供的Vi引物对能够特异性检测CHⅠ型‑CHⅤ型或Mass型的鸡传染性支气管炎病毒，By引物对能够特异性检测CHⅥ型鸡传染性支气管炎病毒，具有检测时间短、特异性强的优势。
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公开(公告)号：CN110184287B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN201910443328.3
申请日：2019-05-24
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供了一种制备重组病毒的方法，是以病毒载体为基体，先通过Red/ET重组引入双向筛选基因，进一步重组将双向筛选基因用目的基因替换，得到含有目的基因和病毒基因组的重组质粒，进而拯救获得重组病毒的。其有益效果在于，本方法步骤简单，能准确快速的实现重组病毒的构建，且构建成功的重组病毒可容纳外源基因，实现多位点定向插入，无痕迹插入，筛选标记方便的优点，最终形成一个可表达多种抗原基因的重组病毒，应用于载体疫苗，还具有宿主范围(56)对比文件李奇蒙.表达IBDVvp2蛋白的rHVT的构建及其免疫保护评价《.中国优秀硕士学位论文全文数据库（农业科技辑）》.2015,(第05期),兰德松等.利用Rde/ET技术构建表达H5亚型禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒《.微生物学报》.2009,第49卷(第01期),Erica Bickerton等.Recombinantinfectious bronchitis viruses expressingheterologous S1 subunits: potential for anew generation of vaccines that replicatein Vero cells《.Journal of GeneralVirology》.2018,第99卷(第12期),DörteLüschow等.Protection of chickensfrom lethal avian influenza A virusinfection by live-virus vaccination withinfectious laryngotracheitis virusrecombinants expressing the hemagglutinin(H5) gene《.Vaccine》.2001,第19卷(第30期),
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116121461A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202310144674.8
申请日：2023-02-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域，特别是涉及一种检测CHⅤ型鸡传染性支气管炎病毒的引物对、试剂盒及其应用。本发明提供的引物对可以特异性扩增CHⅤ型鸡传染性支气管炎病毒，与CHⅠ型、CHⅡ型、CHⅢ型、CHⅣ型、CHⅥ型和Mass型的鸡传染性支气管炎病毒，以及鸡传染性贫血症病毒、禽白血病病毒、新城疫病毒、禽传染性喉气管炎病毒、马立克氏病毒、禽传染性法氏囊病毒、禽网状内皮组织增生症病毒和H9N2亚型禽流感病毒的核酸均无交叉反应，特异性强。利用本发明提供的引物对进行RT‑RAA荧光法检测CHⅤ型鸡传染性支气管炎病毒时，能够在30min内完成检测，具有操作简便、成本低、灵敏度高和假阳性率低的优势。
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公开(公告)号：CN115323075A
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202210778469.2
申请日：2022-06-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种检测鸡传染性支气管炎病毒及基因分型的RT‑RAA引物探针组、试剂盒及其应用，属于分子生物学技术领域。本发明提供的RT‑RAA引物探针组，包括Vi引物探针组和By引物探针组中的至少一组；其中Vi引物探针组中Vi引物的正、反引物、Vi探针的核苷酸序列分别如SEQIDNO.1‑3所示；By引物探针组中By引物的正、反引物、By探针的核苷酸序列分别如SEQIDNO.4‑6所示。本发明提供的Vi引物对能够特异性检测CHⅠ型‑CHⅤ型或Mass型的鸡传染性支气管炎病毒，By引物对能够特异性检测CHⅥ型鸡传染性支气管炎病毒，具有检测时间短、特异性强的优势。
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公开(公告)号：CN114561367A
公开(公告)日：2022-05-31
申请号：CN202210179819.3
申请日：2022-02-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/41 , C12N15/35 , C12N15/85 , A61K39/235 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提出了一种重组3型鸭腺病毒、制备方法及其应用，涉及分子生物学技术领域。该重组3型鸭腺病毒分别能表达鸭病毒性肝炎病毒VP1基因和番鸭细小病毒VP3基因，VP1基因的序列如SEQ ID NO.1所示，VP3基因的序列如SEQ ID NO.2所示，其能够主要解决现目前3型鸭腺病毒疫苗的应用范围较窄的技术问题，另外，本发明还提供了一种重组3型鸭腺病毒的制备方法，该方法不仅操作简单，且耗时短、精确性高。
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公开(公告)号：CN110713989A
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201911161596.2
申请日：2019-11-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法，所述方法是以传染性支气管炎病毒H120疫苗株的感染性克隆为骨架载体，再将骨架载体中的抗原基因置换为传染性支气管炎流行毒株的目的抗原基因，从而获得重组支气管炎病毒的方法，所述目的抗原基因是不同血清型/基因型的传染性支气管炎流行毒株的S基因片段嵌合而成；所述置换还可以是目的抗原基因与N基因同时置换，置换时均需保留骨架载体中原有的S1基因的信号肽区域。其有益效果在于，本发明所述快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法，操作方法简单易行，重复性高，传代稳定性好，能快速高效的应对频繁变异的IBV流行，并且所述方法为载体疫苗的构建提供新思路。
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公开(公告)号：CN110079541A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910373562.3
申请日：2019-05-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/66 , C12N15/86 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用，首先是获得覆盖所选冠状病毒全长基因组的cDNA小片段，然后进行分段克隆，再使用RED/ET重组技术将含有冠状病毒全长基因组的cDNA小片段组装到质粒载体上，筛选获得含有该冠状病毒全长cDNA的感染性克隆。其有益效果在于，本发明首次利用中低拷贝的质粒载体成功构建了鸡传染性支气管炎病毒感染性克隆，为冠状病毒的感染性克隆的构建开辟了新途径，该方法解决了冠状病毒载体选择困难和病毒大基因组在细菌中不稳定的问题，阳性克隆率高，且获得的反向遗传疫苗株克隆具有完整性、传代稳定性和感染性，拯救效率高，为研究冠状病毒的致病机理和开发新型疫苗等提供了有效工具。
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