一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110079541B

    公开(公告)日:2023-06-20

    申请号:CN201910373562.3

    申请日:2019-05-05

    Abstract: 本发明公开了一种构建冠状病毒感染性克隆的方法及其应用,首先是获得覆盖所选冠状病毒全长基因组的cDNA小片段,然后进行分段克隆,再使用RED/ET重组技术将含有冠状病毒全长基因组的cDNA小片段组装到质粒载体上,筛选获得含有该冠状病毒全长cDNA的感染性克隆。其有益效果在于,本发明首次利用中低拷贝的质粒载体成功构建了鸡传染性支气管炎病毒感染性克隆,为冠状病毒的感染性克隆的构建开辟了新途径,该方法解决了冠状病毒载体选择困难和病毒大基因组在细菌中不稳定的问题,阳性克隆率高,且获得的反向遗传疫苗株克隆具有完整性、传代稳定性和感染性,拯救效率高,为研究冠状病毒的致病机理和开发新型疫苗等提供了有效工具。

    一种制备重组病毒的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110184287A

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201910443328.3

    申请日:2019-05-24

    Abstract: 本发明提供了一种制备重组病毒的方法,是以病毒载体为基体,先通过Red/ET重组引入双向筛选基因,进一步重组将双向筛选基因用目的基因替换,得到含有目的基因和病毒基因组的重组质粒,进而拯救获得重组病毒的。其有益效果在于,本方法步骤简单,能准确快速的实现重组病毒的构建,且构建成功的重组病毒可容纳外源基因,实现多位点定向插入,无痕迹插入,筛选标记方便的优点,最终形成一个可表达多种抗原基因的重组病毒,应用于载体疫苗,还具有宿主范围广,生产制备方法容易,安全性好,同时诱导多种免疫反应,无需添加佐剂的优点。

    一种鸡A亚群禽白血病抗性分子标记tva304-305insGCCC及其应用

    公开(公告)号:CN109797229A

    公开(公告)日:2019-05-24

    申请号:CN201910240247.3

    申请日:2019-03-27

    Abstract: 本发明公开了一种鸡A亚群禽白血病抗性分子标记tva304-305insGCCC及其应用。本发明分析了中国鸡种tva基因的遗传变异,发现中国鸡种tva基因DNA序列(GenBank登录号:AY531262.1)第304与305位碱基之间存在GCCC插入突变,发明人进一步研究证实该tva基因的自然突变能够引起宿主抗ALV-A的感染。本发明利用该分子标记制备了筛选A亚群禽白血病抗性鸡的检测试剂盒,能够准确、快速判定检测样本为A亚群禽白血病抗性鸡还是易感鸡,并可应用于筛选A亚群禽白血病遗传抗性鸡品种(系)的育种素材,从而开展A亚群禽白血病遗传抗性鸡品种(系)的选育,具有很好的应用和推广价值。

    鸭腺病毒3型灭活疫苗CH-GD-12-2014株

    公开(公告)号:CN108330108A

    公开(公告)日:2018-07-27

    申请号:CN201711430436.4

    申请日:2017-12-26

    Abstract: 本发明提供了一种鸭腺病毒3型灭活疫苗CH-GD-12-2014株,在2017年11月27保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:V201764,保藏地址为:中国,武汉,武汉大学;全基因序列提交Genebank,Accession No:KR135164;本发明还提供一种多肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;提供编码多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述灭活毒株对各种鸭只均安全,且无副反应,所述灭活株制成疫苗安全有效,可保护同源强毒的攻毒,具有实际和广泛的应用价值。

    一种与黄羽肉鸡饲料转化率相关ST3GAL4基因SNP分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN119162341A

    公开(公告)日:2024-12-20

    申请号:CN202411593047.3

    申请日:2024-11-08

    Abstract: 本发明公开了一种与黄羽肉鸡饲料转化率相关ST3GAL4基因SNP分子标记及其应用,属于遗传基因技术领域。上述SNP分子标记的RS号为rs1059726276,多态性为G/A,位于鸡第24号染色体的第471871位碱基。本发明提供的分子标记经验证与黄羽肉鸡种母鸡饲料转化率性状显著相关,可应用于黄羽肉鸡种母鸡的选育,在选育过程中选留低饲料转化率的黄羽肉鸡种母鸡,可有效降低生产过程中饲料消耗量,提高企业经济效益和竞争力;提供的鉴定上述SNP分子遗传标记的引物和试剂盒,可应用于高效筛选具有饲料转化率优良性状的个体或亲本的黄羽肉鸡种母鸡。

    一种快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法

    公开(公告)号:CN110713989B

    公开(公告)日:2023-11-17

    申请号:CN201911161596.2

    申请日:2019-11-22

    Abstract: 本发明提供了一种快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法,所述方法是以传染性支气管炎病毒H120疫苗株的感染性克隆为骨架载体,再将骨架载体中的抗原基因置换为传染性支气管炎流行毒株的目的抗原基因,从而获得重组支气管炎病毒的方法,所述目的抗原基因是不同血清型/基因型的传染性支气管炎流行毒株的S基因片段嵌合而成;所述置换还可以是目的抗原基因与N基因同时置换,置换时均需保留骨架载体中原有的S1基因的信号肽区域。其有益效果在于,本发明所述快速制备流行性传染性支气管炎疫苗的方法,操作方法简单易行,重复性高,传代稳定性好,能快速高效的应对频繁变异的IBV流行,并且所述方法为载体疫苗的构建提供新思路。

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