一种基于DNA网状结构灵敏检测miRNA的方法

    公开(公告)号:CN111575353A

    公开(公告)日:2020-08-25

    申请号:CN202010316939.4

    申请日:2020-04-21

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种基于DNA网状结构灵敏检测miRNA的方法,涉及生物传感领域。通过设计结构可切换的哑铃型探针,提高了目标识别的特异性,同时又使得滚环扩增产物具有串联重复茎环结构的特点;滚环扩增产物与修饰DNA-AuNPs杂交形成DNA网状结构,使得AuNPs发生聚集,利用动态光散射技术对AuNPs尺寸进行测量,从而实现miRNA的检测。本发明灵敏度高、特异性好。

    一种利用整合式装置检测食物中的鼠伤寒沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN110220951A

    公开(公告)日:2019-09-10

    申请号:CN201910595394.2

    申请日:2019-07-03

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种利用整合式装置检测食物中的鼠伤寒沙门氏菌的方法,涉及核酸检测领域。整合式装置是由磁板、纸电极芯片和粘贴膜构成的多层板状结构,通过滑动中间磁板的方式实现样本、纯化缓冲液和扩增试剂的连续引入,嵌入磁板中的FTA卡用来从细菌中提取核酸并作为后续等温反应的反应室。该方法利用这个整合式装置完成鼠伤寒沙门氏菌核酸提取、等温扩增和电化学检测的核酸检测步骤,避免了传统方法的繁琐复杂的操作步骤和对精密仪器的需求,快速、灵敏的实现了对蛋清、饮用水和牛奶样品中的鼠伤寒沙门氏菌的检测,具有快速、便捷、低成本、高效灵敏等分析性能,对食品安全安全分析具有潜在的应用价值。

    一种新型整合式核酸检测装置

    公开(公告)号:CN110129188A

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201910484139.0

    申请日:2019-06-05

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开一种新型整合式核酸检测装置,该装置集成了多层磁结构,FTA卡和纸电极芯片,可以完成核酸提取,环介导等温扩增(LAMP)扩增和电化学检测。其核心多层结构由上部样品层,中层滑动层和下层电极板组成。上层板提供能够滴加样品、纯化缓冲液进而扩增试剂的圆孔。中层磁性板扮演控制阀门的角色,通过简单地滑动磁板来控制样品,纯化缓冲液和扩增试剂的连续引入。亚甲基蓝(MB)和双链LAMP扩增产物之间的电化学询问反应与纸电极装置组合,用于高灵敏度监测LAMP扩增反应。本发明成功构建了一种从“样品—答案”的新型整合式核酸检测装置,通过简单的滑动操作,实现整个核酸检测的过程,展现出令人满意的医疗诊断和食品安全分析的能力。

    一种利用整合式装置检测食物中的鼠伤寒沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN110220951B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201910595394.2

    申请日:2019-07-03

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种利用整合式装置检测食物中的鼠伤寒沙门氏菌的方法,涉及核酸检测领域。整合式装置是由磁板、纸电极芯片和粘贴膜构成的多层板状结构,通过滑动中间磁板的方式实现样本、纯化缓冲液和扩增试剂的连续引入,嵌入磁板中的FTA卡用来从细菌中提取核酸并作为后续等温反应的反应室。该方法利用这个整合式装置完成鼠伤寒沙门氏菌核酸提取、等温扩增和电化学检测的核酸检测步骤,避免了传统方法的繁琐复杂的操作步骤和对精密仪器的需求,快速、灵敏的实现了对蛋清、饮用水和牛奶样品中的鼠伤寒沙门氏菌的检测,具有快速、便捷、低成本、高效灵敏等分析性能,对食品安全安全分析具有潜在的应用价值。

    一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法

    公开(公告)号:CN107727621B

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201710910583.5

    申请日:2017-09-29

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法,涉及荧光检测miRNA领域。通过设计互补探针,无需加入相应的标记和特异性酶,达到目标物的特异性识别。利用原卟啉和G‑四链体结合后荧光增强的特性实现光信号增大的表征,达到检测目标物的目的。使用互补的自发进行链置换反应探针破坏上述结合,实现NOT门输出。本方法检测成本低、灵敏度高。

    一种整合式核酸检测装置

    公开(公告)号:CN110129188B

    公开(公告)日:2022-09-20

    申请号:CN201910484139.0

    申请日:2019-06-05

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开一种整合式核酸检测装置,该装置集成了多层磁结构,FTA卡和纸电极芯片,可以完成核酸提取,环介导等温扩增(LAMP)扩增和电化学检测。其核心多层结构由上部样品层,中层滑动层和下层电极板组成。上层样品板提供能够滴加样品、纯化缓冲液进而扩增试剂的圆孔。中层磁性板扮演控制阀门的角色,通过简单地滑动磁板来控制样品,纯化缓冲液和扩增试剂的连续引入。亚甲基蓝(MB)和双链LAMP扩增产物之间的电化学询问反应与纸电极装置组合,用于高灵敏度监测LAMP扩增反应。本发明成功构建了一种从“样品—答案”的整合式核酸检测装置,通过简单的滑动操作,实现整个核酸检测的过程,展现出令人满意的医疗诊断和食品安全分析的能力。

    一种基于金银双金属纳米团簇增强荧光结合环介导等温扩增检测甲型流感病毒的方法

    公开(公告)号:CN110129484A

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201910484138.6

    申请日:2019-06-05

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种基于金银双金属纳米团簇增强荧光结合环介导等温扩增检测甲型流感病毒的方法,涉及荧光检测技术领域。金银双金属纳米团簇表现出良好的荧光性能,Cu2+离子能猝灭纳米团簇的荧光,而PPi2+离子能与Cu2+发生配位反应,使猝灭的荧光恢复。利用4组引物对甲型H1N1流感病毒核酸6个区域实现特异性的识别,进而对模板核酸进行扩增,在核酸链扩增过程中有副产物PPi2+离子生成,随着反应的进行,PPi2+的含量逐渐增大,并且PPi2+的含量与起始模板核酸的加入量成正相关。扩增1小时后的反应液中PPi2+离子能使纳米团簇荧光恢复,通过荧光恢复的强度变化实现甲型H1N1流感病毒核酸的定量分析。本方法包括双金属纳米团簇合成—双金属纳米团簇荧光猝灭—环介导等温扩增反应—双金属纳米团簇荧光恢复—荧光检测—H1N1病毒核酸检测线测定。

    一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法

    公开(公告)号:CN107727621A

    公开(公告)日:2018-02-23

    申请号:CN201710910583.5

    申请日:2017-09-29

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种无酶标记DNA逻辑体系检测miRNA的方法,涉及荧光检测miRNA领域。通过设计互补探针,无需加入相应的标记和特异性酶,达到目标物的特异性识别。利用原卟啉和G-四链体结合后荧光增强的特性实现光信号增大的表征,达到检测目标物的目的。使用互补的自发进行链置换反应探针破坏上述结合,实现NOT门输出。本方法检测成本低、灵敏度高。

    一种纸基灵敏检测miRNA的方法

    公开(公告)号:CN107236790A

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201710319907.8

    申请日:2017-05-09

    Applicant: 济南大学

    Inventor: 刘海云 杨浩 何涛

    CPC classification number: C12Q1/682 C12Q2525/207 C12Q2525/301 C12Q2521/327

    Abstract: 本发明公开了一种纸基灵敏检测miRNA的方法,更确切的说采用特异性双链核酸酶在纸芯片上构建了miRNA的信号放大机制,通过固定在纸芯片上的纳米金电极上的金与亚甲基蓝标签标记巯基修饰的DNA发夹探针SH‑CP‑21上的巯基形成金‑硫键,将此发夹探针自组装在纸芯片上,并用巯基乙醇有在纸芯片上表面阻挡此发夹探针,随后由于目标miRNA和固定在纸芯片上的发夹探针之间的杂交导致RNA / DNA双链体的形成,并且双链特异性核酸酶会切割RNA / DNA双链体中标记的发夹探针,切割后带有标记发夹探针又会与目标miRNA杂交导致RNA / DNA双链体的形成,照此循环,由于标记的发夹探针被切割,再用电化学方法检测的电流与没切割之前检测的电流有很大差距,从而提高检测的灵敏度,降低检测成本。

    一种基于DNA网状结构灵敏检测miRNA的方法

    公开(公告)号:CN111575353B

    公开(公告)日:2022-09-30

    申请号:CN202010316939.4

    申请日:2020-04-21

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本专利公开了一种基于DNA网状结构灵敏检测miRNA的方法,涉及生物传感领域。通过设计结构可切换的哑铃型探针,提高了目标识别的特异性,同时又使得滚环扩增产物具有串联重复茎环结构的特点;滚环扩增产物与修饰DNA‑AuNPs杂交形成DNA网状结构,使得AuNPs发生聚集,利用动态光散射技术对AuNPs尺寸进行测量,从而实现miRNA的检测。本发明灵敏度高、特异性好。

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