一种核糖体印迹测序文库构建方法

    公开(公告)号:CN112899345A

    公开(公告)日:2021-06-04

    申请号:CN201911217929.9

    申请日:2019-12-03

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明提供了一种核糖体印迹测序文库构建方法。本发明的文库构建方法包括如下步骤:(1)提取样品的RFP‑RNA;(2)修复RFP‑RNA的两端结构;(3)将正常结构的RNA采用small RNA建库试剂盒进行文库构建。本发明将RFP‑RNA双端修复,使其恢复成正常的RNA结构,能够和市面上的small RNA试剂盒无缝衔接,直接建库,无需去除rRNA,无需采用复杂的RFP‑RNA建库方法,简化了建库实验步骤,降低了物资成本,提高了实验的稳定性;减少了4~5天的实验时间,降低了50%的时间成本。本发明的文库构建方法适用于各类物种;得到的测序数据质量高,和理论水平一致。

    使用分子筛离心柱快速完整获取mRNA核糖体新生肽链复合物的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110004142A

    公开(公告)日:2019-07-12

    申请号:CN201910193016.1

    申请日:2019-03-14

    Applicant: 暨南大学

    Inventor: 卢小龙 张弓

    Abstract: 本发明提供了一种使用分子筛离心柱快速完整获取mRNA核糖体新生肽链复合物的方法及其应用。本发明通过使用裂解液裂解生物样品,得到裂解产物;通过差速离心去除裂解液中的碎片,得到裂解后的上清液;使用分子筛离心柱来纯化裂解后的上清液,得到高纯度的mRNA核糖体新生肽链复合物。该方法不需要贵重仪器超速离心机,操作简单,步骤少,被RNase污染的概率小,实验重复性高,分子筛离心柱纯化步骤耗时只需10min左右,极大地缩短了实验时间,且可以大批量操作,解决了蔗糖密度超速离心法耗时长,操作难度高,通量低等限制,同时可以获得高质量的RNC-mRNA测序数据,对RNC技术推广有重要推动作用。

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