公开(公告)号：CN107189984A

公开(公告)日：2017-09-22

申请号：CN201710454395.6

申请日：2017-06-13

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李巍 ,  廖凯 ,  卢丹 ,  虞茜 ,  徐海荣

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12Q1/26

CPC classification number: C12N9/0071 ,  C12N15/86 ,  C12N2740/15043 ,  C12Q1/26 ,  C12Y114/14001 ,  G01N2333/90245

Abstract: 本发明提供一种稳定表达细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因449位单碱基突变体的人源化细胞模型及其构建方法和应用，及该方法构建的细胞表达的突变体的应用。所述细胞模型是借助慢病毒载体将编码449位单碱基突变体CYP2C9*8和CYP2C9*27的质粒导入人胚肾293T细胞，通过单克隆筛选获得分别稳定表达CYP2C9*8和CYP2C9*27的单克隆细胞。通过实时定量PCR、P450含量检测和对经典底物双氯芬酸的代谢进行表达水平和功能的验证。本发明方法构建的细胞可用于细胞水平CYP2C9的449位突变体的表达和功能研究，预测449位突变体存在时肝脏对CYP2C9底物的处置情况。