公开(公告)号：CN107365787B

公开(公告)日：2024-02-06

申请号：CN201710763557.4

申请日：2017-08-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  孙舒 ,  秦爱建 ,  程晓薇 ,  孔正茹 ,  顾晨曦 ,  武宗仪

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/79

Abstract: 具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用，涉及病毒编码蛋白表达及功能研究生物技术领域。本发明以pGEX‑6p‑1‑p27/BL21质粒作为模板，采用特异性引物进行PCR扩增，回收PCR片段后与pcDNA3.1载体链接，得到阳性的重组质粒，即具有抑制细胞对LPS和Poly(I:C)刺激免疫反应功能的真核表达载体。本发明构建方法简单、合理，真核表达载体转染细胞表达后，可应用于抑制LPS或Poly(I:C)刺激细胞免疫反应中，为抗禽白血病免疫抑制药物的研究与开发提供靶点。

公开(公告)号：CN106754691A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611139082.3

申请日：2016-12-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  程晓薇 ,  秦爱建 ,  张杰 ,  孔正茹 ,  顾晨曦 ,  武宗仪

IPC: C12N5/078

Abstract: 一种从家禽全血样本快速分离高纯度红细胞的方法，涉及家禽血液分离鉴定检测技术领域。将柠檬酸钠或肝素抗凝的家禽血样先与PBS或生理盐水混合后再加到淋巴细胞分离液表面，经水平离心机离心处理，弃去离心后的血浆、淋巴细胞、淋巴细胞分离液和最上层的红细胞，取得高纯家禽红细胞，纯度达到99.9%以上，没有血液中其他细胞，尤其是淋巴细胞的污染，为研究家禽红细胞的生物学功能提供了非常好的生物样品。本发明建立了一种方便快速有效分离高纯度家禽红细胞的方法，便于显微操作，能够高效、准确地获取高纯度家禽红细胞进行后续的细胞鉴定及生物学功能研究。

公开(公告)号：CN106680497A

公开(公告)日：2017-05-17

申请号：CN201611225705.9

申请日：2016-12-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  顾晨曦 ,  秦爱建 ,  张杰 ,  程晓薇 ,  孔正茹 ,  武宗仪

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/535 ,  G01N33/558

CPC classification number: G01N33/56983 ,  G01N33/535 ,  G01N33/558

Abstract: 一种多肽抗原检测小鹅瘟抗体ELISA试剂盒，属于生物技术检测领域，利用人工合成3种GPV‑VP3特异性偶联多肽抗原作为包被液快速检测GPV抗体，有效提高多肽与目的抗体的结合效率，从而显著提高检测灵敏度，同时显著降低非特异背景读值，特异性高。本发明的GPV抗体ELISA检测试剂盒具有操作简单、诊断速度快、成本低、在进行大规模检测中经济方便等优点,具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN106680497B

公开(公告)日：2018-07-10

申请号：CN201611225705.9

申请日：2016-12-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  顾晨曦 ,  秦爱建 ,  张杰 ,  程晓薇 ,  孔正茹 ,  武宗仪

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/535 ,  G01N33/558

Abstract: 一种多肽抗原检测小鹅瘟抗体ELISA试剂盒，属于生物技术检测领域，利用人工合成3种GPV‑VP3特异性偶联多肽抗原作为包被液快速检测GPV抗体，有效提高多肽与目的抗体的结合效率，从而显著提高检测灵敏度，同时显著降低非特异背景读值，特异性高。本发明的GPV抗体ELISA检测试剂盒具有操作简单、诊断速度快、成本低、在进行大规模检测中经济方便等优点,具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN107365787A

公开(公告)日：2017-11-21

申请号：CN201710763557.4

申请日：2017-08-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  孙舒 ,  秦爱建 ,  程晓薇 ,  孔正茹 ,  顾晨曦 ,  武宗仪

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/79

CPC classification number: C12N15/66 ,  C12N15/79

Abstract: 具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用，涉及病毒编码蛋白表达及功能研究生物技术领域。本发明以pGEX-6p-1-p27/BL21质粒作为模板，采用特异性引物进行PCR扩增，回收PCR片段后与pcDNA3.1载体链接，得到阳性的重组质粒，即具有抑制细胞对LPS和Poly(I:C)刺激免疫反应功能的真核表达载体。本发明构建方法简单、合理，真核表达载体转染细胞表达后，可应用于抑制LPS或Poly(I:C)刺激细胞免疫反应中，为抗禽白血病免疫抑制药物的研究与开发提供靶点。

公开(公告)号：CN105385765A

公开(公告)日：2016-03-09

申请号：CN201510953062.9

申请日：2015-12-17

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  秦爱建 ,  张杰 ,  张丹阳 ,  程晓薇 ,  胡海 ,  石亚运 ,  金文杰 ,  邵红霞

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2561/101 ,  C12Q2561/113

Abstract: 实时荧光绝对定量检测家禽beta连环蛋白的试剂盒及应用，属于分析检测领域，检测试剂盒包含上游引物β-catenin F：SEQ ID N0. 1，下游引物β-catenin R: SEQ IDN0. 2，以及TaqMan探针β-catenin P: 5‘-FAM-aag ctg act tga tgg agt tgga-TAMRA-3'。本发明可以精确定量检测标本中禽家β-catenin的mRNA表达量。该试剂盒可以用于鸡体内各组织脏器中禽家β-catenin的表达分析，也可以用于检测不同状态下细胞中禽家β-catenin表达水平的变化，具有高灵敏度、高特异性、高重复性的优点。