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公开(公告)号:CN120060366A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510284197.4
申请日:2025-03-11
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/52 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种巴马小型猪的ATP7B基因编辑体细胞的制备方法,包括以下步骤:S1、胎儿成纤维细胞的分离培养及鉴定,S2、ATP7B基因sgRNA设计,S3、Cas9‑ATP7B‑sgRNA表达载体的构建,S4、胎儿成纤维细胞的转染及sgRNA的筛选,S5、基因编辑单克隆细胞系的构建等等,从而完成基因编辑的巴马小型猪胎儿成纤维单克隆细胞的制备。本发明方法简单,可靠性高,具有较高的基因编辑效率,获得的ATP7B基因编辑的巴马小型猪体细胞,不仅有继续发育的能力,可用于后续WD动物模型的制备,而且其本身与心血管生长性状与人类相似,能够为WD神经退行性发病及恶化机制的研究提供理想模型。
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公开(公告)号:CN117645971A
公开(公告)日:2024-03-05
申请号:CN202311636610.6
申请日:2023-12-01
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/077 , C12N5/0775 , C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种猪血浆基质胶及其制备方法和应用,所述方法包括以下步骤:吸取无菌猪血浆和猪血小板裂解液到离心管中,再吸取钙盐溶液加入离心管,充分混匀后转移至培养皿或模具,放入培养箱中,使纤维蛋白形成析出生成的基质充分凝固;其中,血小板和血浆可冷冻长期保存,解冻后各组分可优化配比,并可添加其他培养基;利用该方法可将细胞、组织和类器官与基质以表面、混合和夹层等方法共同培养。本发明通过采集新鲜抗凝猪血分离血浆,制备猪血浆基质胶,猪血浆基质胶用于细胞培养时能够提高细胞增殖速率且不改变细胞的生长状态和分化潜能。
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