一种巴马小型猪的ATP7B基因编辑体细胞的制备方法

    公开(公告)号:CN120060366A

    公开(公告)日:2025-05-30

    申请号:CN202510284197.4

    申请日:2025-03-11

    Abstract: 本发明公开了一种巴马小型猪的ATP7B基因编辑体细胞的制备方法,包括以下步骤:S1、胎儿成纤维细胞的分离培养及鉴定,S2、ATP7B基因sgRNA设计,S3、Cas9‑ATP7B‑sgRNA表达载体的构建,S4、胎儿成纤维细胞的转染及sgRNA的筛选,S5、基因编辑单克隆细胞系的构建等等,从而完成基因编辑的巴马小型猪胎儿成纤维单克隆细胞的制备。本发明方法简单,可靠性高,具有较高的基因编辑效率,获得的ATP7B基因编辑的巴马小型猪体细胞,不仅有继续发育的能力,可用于后续WD动物模型的制备,而且其本身与心血管生长性状与人类相似,能够为WD神经退行性发病及恶化机制的研究提供理想模型。

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