公开(公告)号：CN109988784B

公开(公告)日：2021-02-02

申请号：CN201910304470.X

申请日：2019-04-16

Applicant: 台州学院

Inventor： 陈潭 ,  杨仲毅 ,  陈良明 ,  陶宇翔 ,  吴智超 ,  陈永江 ,  石晓梦 ,  许殷铭

IPC: C12P7/40 ,  C12N11/14

Abstract: 本发明公开了一种固定化甘醇酸氧化酶催化合成丙酮酸的方法，包括如下步骤：配置L‑乳酸水溶液，调节L‑乳酸水溶液的pH值为8.5～9.5，加入过氧化氢酶、辅酶及固定化甘醇酸氧化酶，在5‑30℃下通入空气或氧气进行反应。本发明采用固定化甘醇酸氧化酶、结合常压下催化制备丙酮酸，实现从L‑乳酸到丙酮酸的高效转化。

公开(公告)号：CN109988784A

公开(公告)日：2019-07-09

申请号：CN201910304470.X

申请日：2019-04-16

Applicant: 台州学院

Inventor： 陈潭 ,  杨仲毅 ,  陈良明 ,  陶宇翔 ,  吴智超 ,  陈永江 ,  石晓梦 ,  许殷铭

IPC: C12P7/40 ,  C12N11/14

Abstract: 本发明公开了一种固定化甘醇酸氧化酶催化合成丙酮酸的方法，包括如下步骤：配置L‑乳酸水溶液，调节L‑乳酸水溶液的pH值为8.5～9.5，加入过氧化氢酶、辅酶及固定化甘醇酸氧化酶，在5‑30℃下通入空气或氧气进行反应。本发明采用固定化甘醇酸氧化酶、结合常压下催化制备丙酮酸，实现从L‑乳酸到丙酮酸的高效转化。

公开(公告)号：CN111454934B

公开(公告)日：2021-11-30

申请号：CN202010279909.0

申请日：2020-04-10

Applicant: 台州学院 ,  台州市博纳化工有限公司

Inventor： 杨仲毅 ,  陶宇翔 ,  陈良明 ,  汪怡璐

IPC: C12N11/091 ,  C12N11/10 ,  C12N11/14 ,  C12N9/88

Abstract: 本发明涉及一种EDDS裂合酶固定化酶的制备方法和应用，属于生物技术领域。为了解决现有的纯度差和转化率不高的问题，提供一种EDDS裂合酶固定化酶的制备方法，该方法包括将带有His‑tag的EDDS裂合酶的基因工程菌经发酵及粗提后得到EDDS裂合酶粗酶液；粗酶液与金属亲和载体接触，使EDDS裂合酶吸附到金属亲和载体上进行纯化；将金属亲和载体上的EDDS裂合酶进行洗脱，得到纯化后的酶液；将酶液和固定化载体进行固定，得到带有His‑tag的EDDS裂合酶固定化酶，用于以富马酸和乙二胺为底物合成(S,S)‑EDDS。本发明能有效除去酶液中富马酸酶，起到高效纯化效果；且有高效酶活能力和高重复利用率。

公开(公告)号：CN111454934A

公开(公告)日：2020-07-28

申请号：CN202010279909.0

申请日：2020-04-10

Applicant: 台州学院 ,  台州市博纳化工有限公司

Inventor： 杨仲毅 ,  陶宇翔 ,  陈良明 ,  汪怡璐

IPC: C12N11/08 ,  C12N11/10 ,  C12N11/14 ,  C12N9/88

Abstract: 本发明涉及一种EDDS裂合酶固定化酶的制备方法和应用，属于生物技术领域。为了解决现有的纯度差和转化率不高的问题，提供一种EDDS裂合酶固定化酶的制备方法，该方法包括将带有His-tag的EDDS裂合酶的基因工程菌经发酵及粗提后得到EDDS裂合酶粗酶液；粗酶液与金属亲和载体接触，使EDDS裂合酶吸附到金属亲和载体上进行纯化；将金属亲和载体上的EDDS裂合酶进行洗脱，得到纯化后的酶液；将酶液和固定化载体进行固定，得到带有His-tag的EDDS裂合酶固定化酶，用于以富马酸和乙二胺为底物合成(S,S)-EDDS。本发明能有效除去酶液中富马酸酶，起到高效纯化效果；且有高效酶活能力和高重复利用率。