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公开(公告)号：CN117770132B
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202311821621.1
申请日：2023-12-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H1/08
Abstract: 本发明公开了一种利用秋水仙素诱导四倍体杂交鹅掌楸C136的方法，属于植物快繁技术领域。本发明将杂交鹅掌楸C136组培苗接种在继代培养基中进行继代培养；获得杂交鹅掌楸C136顶芽后接种到含有秋水仙素的液体诱导培养基中进行加倍诱导处理；将加倍诱导处理后的顶芽接种到生根培养基进行植株再生培养，筛选出染色体数为4n的生根苗；将生根苗再生植株的茎段接种到不定芽诱导培养基上，最终纯化培养筛选得到四倍体杂交鹅掌楸C136。结果表明，在含0.3％(w/v)秋水仙素的液体诱导培养基中处理72h，四倍体诱导率最高。该方法简单高效，为杂交鹅掌楸的四倍体育种提供了一种创新的技术手段。
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公开(公告)号：CN117770132A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202311821621.1
申请日：2023-12-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H1/08
Abstract: 本发明公开了一种利用秋水仙素诱导四倍体杂交鹅掌楸C136的方法，属于植物快繁技术领域。本发明将杂交鹅掌楸C136组培苗接种在继代培养基中进行继代培养；获得杂交鹅掌楸C136顶芽后接种到含有秋水仙素的液体诱导培养基中进行加倍诱导处理；将加倍诱导处理后的顶芽接种到生根培养基进行植株再生培养，筛选出染色体数为4n的生根苗；将生根苗再生植株的茎段接种到不定芽诱导培养基上，最终纯化培养筛选得到四倍体杂交鹅掌楸C136。结果表明，在含0.3％(w/v)秋水仙素的液体诱导培养基中处理72h，四倍体诱导率最高。该方法简单高效，为杂交鹅掌楸的四倍体育种提供了一种创新的技术手段。
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公开(公告)号：CN115362934B
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202210583055.4
申请日：2022-05-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用秋水仙素诱导杂交鹅掌楸良种“南林金森E1号”四倍体的方法，包括：1)“南林金森E1”杂交鹅掌楸胚性愈伤均一化处理；2)秋水仙素滴加处理体胚诱导过程中的愈伤；其中，秋水仙素水溶液的mg/mL浓度为0.01％～0.1％；3)将步骤2)中暗培养材料转光照培养诱导植株再生；4)四倍体植株的初步筛选及幼苗移栽；5)再生植株的倍性鉴定。本发明以胚性愈伤为外植体，通过秋水仙素处理获得纯合同源四倍体杂交鹅掌楸“南林金森E1号”，克服传统的以种子、茎尖等为外植体诱导染色体加倍时出现嵌合体的缺陷，该方法操作容易，诱导稳定，是一种适合鹅掌楸属植物多倍体诱导的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115362934A
公开(公告)日：2022-11-22
申请号：CN202210583055.4
申请日：2022-05-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用秋水仙素诱导杂交鹅掌楸良种“南林金森E1号”四倍体的方法，包括：1)“南林金森E1”杂交鹅掌楸胚性愈伤均一化处理；2)秋水仙素滴加处理体胚诱导过程中的愈伤；其中，秋水仙素水溶液的mg/mL浓度为0.01％～0.1％；3)将步骤2)中暗培养材料转光照培养诱导植株再生；4)四倍体植株的初步筛选及幼苗移栽；5)再生植株的倍性鉴定。本发明以胚性愈伤为外植体，通过秋水仙素处理获得纯合同源四倍体杂交鹅掌楸“南林金森E1号”，克服传统的以种子、茎尖等为外植体诱导染色体加倍时出现嵌合体的缺陷，该方法操作容易，诱导稳定，是一种适合鹅掌楸属植物多倍体诱导的方法。
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公开(公告)号：CN118995752A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411403434.6
申请日：2024-10-09
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了LhAHL15基因在诱导杂交鹅掌楸多倍体中的应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明首次公开的杂交鹅掌楸LhAHL15基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明构建杂交鹅掌楸LhAHL15基因的表达载体；将构建的杂交鹅掌楸LhAHL15基因的表达载体转化到杂交鹅掌楸中；培育筛选并获得多倍体转基因杂交鹅掌楸植株。构建得到的转基因体胚苗叶片颜色变深、叶片增厚、茎秆增粗、植株矮化、叶片总面积增大，叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量增加，周期蛋白基因及细胞壁扩展相关基因表达量增加。
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公开(公告)号：CN118318733A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410456392.6
申请日：2024-04-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种四倍体杂交鹅掌楸的快繁方法，属于植物快繁技术领域。本发明将杂交鹅掌楸未成熟合子胚消毒后接种到固体愈伤诱导培养基中，然后用固体愈伤增殖培养基进行继代培养后，将其接种于液体愈伤增殖培养基中，进行愈伤组织预处理；将预处理后的愈伤组织接种于含安磺灵的液体愈伤增殖培养基中，进行愈伤组织的加倍处理后将其转置于体胚诱导培养基上，培育得到杂交鹅掌楸成熟体胚；将杂交鹅掌楸成熟体胚转移至基础培养基中，培养得到四倍体杂交鹅掌楸幼苗。得到的四倍体杂交鹅掌楸与二倍体杂交鹅掌楸在叶面积指数、叶长、叶宽等叶片的形态指标均存在显著差异，为进一步开展杂交鹅掌楸四倍体育种与遗传机理研究提供实验材料。
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公开(公告)号：CN116491419A
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202310488018.X
申请日：2023-04-28
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种纯合同源四倍体杂交鹅掌楸的快繁方法，属于植物快繁技术领域。该纯合同源四倍体杂交鹅掌楸的快繁方法，将杂交鹅掌楸胚性愈伤接种到液体愈伤增殖培养基中进行预培养，建立愈伤预培养悬浮系；将预培养后的悬浮细胞接种到含秋水仙素的液体愈伤增殖培养基中诱导悬浮细胞染色体加倍，建立秋水仙素处理悬浮系；将秋水仙素处理后的悬浮细胞接种到固体体胚诱导培养基中进行体胚诱导，得到四倍体子叶胚；将四倍体子叶胚接种至植株再生培养基中进行植株再生培养，得到纯合同源四倍体杂交鹅掌楸。结果表明：使用0.1％的秋水仙素处理21d后四倍体的诱导率高达32％，良种“南林金森E1号”的诱导率优于16‑HS×GA基因型。
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公开(公告)号：CN116465702A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202310442720.2
申请日：2023-04-23
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸属材料染色体的制片方法，属于植物细胞遗传学技术领域。本发明公开的鹅掌楸染色体的制片方法，将鹅掌楸属植物胚性愈伤或球形胚或心形胚或鱼雷胚或子叶胚或黄化苗根尖为染色体制片材料置于饱和对二氯苯溶液中进行预处理2‑4h；将预处理后的材料置于卡诺固定液中进行固定12‑24h；将固定后的材料转至1mol/L的HCl溶液中进行解离2‑8min；将解离后的材料使用改良卡宝品红染液进行染色2‑6h；将染色后的材料置于载玻片上用解剖针将其迅速碾碎，滴加染液后覆盖一张盖玻片，将材料压散后即得到鹅掌楸的染色体制片，为鹅掌楸属植物细胞遗传学和倍性育种等研究方向提供了重要的技术手段。
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