公开(公告)号：CN116656741A

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202310455540.8

申请日：2023-04-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁子国 ,  杨静欢 ,  袁浩 ,  杨子鹏 ,  张秀香 ,  胡潇予

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/12 ,  A61K38/16 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明属于生物技术技术领域，具体涉及一种可溶性GRA7蛋白的杆状病毒制备方法及其应用，包括如下步骤：(1)对弓形虫GRA7的cDNA序列进行合成；(2)双酶切后连接至pFastBacHT‑A载体，制得连接产物；(3)步骤(2)构建的载体转入DH10Bac感受态细胞，经抗性蓝白斑筛选、分离，得重组杆状病毒穿梭载体reBacmid‑GRA7；(4)步骤(3)构建的载体转染sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒并进行传代扩增培养；本发明提供了昆虫细胞‑杆状病毒表达系统高效表达弓形虫GRA7蛋白的方法。本发明所获得的外源蛋白具有蛋白生物学功能所需的蛋白质折叠和适当翻译后修饰，获得具有生物活性的GRA7蛋白以及其在恶性肿瘤治疗方面的作用，可以开发为新型的抗肺癌药物。