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公开(公告)号：CN104017080B
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201410263525.4
申请日：2014-06-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种犬源单链抗体及其构建方法和应用。本发明通过设计犬抗体可变区简并引物，成功扩增出犬的重链可变区VH和轻链可变区VL基因。在此基础上利用噬菌体展示技术，成功构建犬源单链抗体scFv文库。所构建的scFv单链抗体库具有多样性和足够大的库容量。本发明通过Dot‑ELISA方法用犬DEA1.1血型抗原从scFv单链抗体库中筛选到3株能够与犬DEA1.1血型抗原相结合的单链抗体。其中Clone16具有较强的结合特性。根据Clone16基因构建了pET‑32a‑Clone16重组蛋白进行原核表达，纯化得到的抗体具有结合活性。为制备犬DEA1.1血型鉴定试剂提供了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN104107436B
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201410266825.8
申请日：2014-06-16
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于血液保存技术领域，具体公开了一种用于保存犬全血的保存液及其应用。本发明通过添加SOD到CPDA保存液中对犬全血进行保存，探讨SOD对犬全血保存的作用。结果表明SOD添加量和保存效果不成规律性变化，总体来说，添加低活性单位SOD到CPDA保存液中，能增强犬全血保存时间和效果；高活性单位SOD对犬全血保存无明显效果。犬全血保存液的最佳配方为：26.30g枸椽酸钠、3.27g枸椽酸、2.22g磷酸二氢钠、25.5g无水葡萄糖、0.275g腺嘌呤、2000U超氧化物歧化酶冻干粉、1000mL蒸馏水。使用该配方的CPDA保存液对犬全血的保存时间最长可达35～42d。
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公开(公告)号：CN103223162A
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201310114762.X
申请日：2013-04-03
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明属于病毒疫苗制备技术领域，具体公开了一株H3N2犬流感病毒株CGD1的应用。本发明利用自行分离、鉴定、保存的3株H3N2犬流感病毒株CGD1、CGD2和CGD3接种鸡胚进行传代培养，发现病毒株CGD1的遗传稳定性好，因此选择CGD1株进行噬斑纯化病毒选育出了一株H3N2犬流感病毒疫苗株CIVGDYM1，该疫苗株已于2013年2月1日送交北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心保藏，保藏号为CGMCCNO：7218。利用H3N2犬流感病毒疫苗株CIVGDYM1接种鸡胚进行病毒繁殖，经过收获鸡胚尿囊液、灭活、配苗等步骤可以制备出安全、有效的H3N2犬流感病毒灭活疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103487590B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310394101.7
申请日：2013-09-03
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/80
Abstract: 本发明具体公开了一种血型抗体的间接Dot-ELISA检测方法与应用。所述方法为将硝酸纤维素膜固定于96孔板上，然后直接将红细胞膜包被硝酸纤维素膜上，与待测抗体反应，通过酶标二抗形成抗原-抗体复合物。所述Dot-ELISA板可以用商业化的ELISA检测分析仪器，进而能够达到自动化操作的目的，达到节省人力，减少人为误差，和高通量检测的目的。本研究用的斑点酶联免疫吸附测定方法是间接Coombs实验的8倍以上，高灵敏度可以增加低浓度和弱亲和抗体的检测准确度，进一步改进了血型检测方法和改善输血安全。
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公开(公告)号：CN104017080A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410263525.4
申请日：2014-06-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种犬源单链抗体及其构建方法和应用。本发明通过设计犬抗体可变区简并引物，成功扩增出犬的重链可变区VH和轻链可变区VL基因。在此基础上利用噬菌体展示技术，成功构建犬源单链抗体scFv文库。所构建的scFv单链抗体库具有多样性和足够大的库容量。本发明通过Dot-ELISA方法用犬DEA1.1血型抗原从scFv单链抗体库中筛选到3株能够与犬DEA1.1血型抗原相结合的单链抗体。其中Clone16具有较强的结合特性。根据Clone16基因构建了pET-32a-Clone16重组蛋白进行原核表达，纯化得到的抗体具有结合活性。为制备犬DEA1.1血型鉴定试剂提供了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN104107436A
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201410266825.8
申请日：2014-06-16
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于血液保存技术领域，具体公开了一种用于保存犬全血的保存液及其应用。本发明通过添加SOD到CPDA保存液中对犬全血进行保存，探讨SOD对犬全血保存的作用。结果表明SOD添加量和保存效果不成规律性变化，总体来说，添加低活性单位SOD到CPDA保存液中，能增强犬全血保存时间和效果；高活性单位SOD对犬全血保存无明显效果。犬全血保存液的最佳配方为：26.30g枸椽酸钠、3.27g枸椽酸、2.22g磷酸二氢钠、25.5g无水葡萄糖、0.275g腺嘌呤、2000U超氧化物歧化酶冻干粉、1000mL蒸馏水。使用该配方的CPDA保存液对犬全血的保存时间最长可达35～42d。
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公开(公告)号：CN103223162B
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201310114762.X
申请日：2013-04-03
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明属于病毒疫苗制备技术领域，具体公开了一株H3N2犬流感病毒株CGD1的应用。本发明利用自行分离、鉴定、保存的3株H3N2犬流感病毒株CGD1、CGD2和CGD3接种鸡胚进行传代培养，发现病毒株CGD1的遗传稳定性好，因此选择CGD1株进行噬斑纯化病毒选育出了一株H3N2犬流感病毒疫苗株CIVGDYM1，该疫苗株已于2013年2月1日送交北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心保藏，保藏号为CGMCCNO：7218。利用H3N2犬流感病毒疫苗株CIVGDYM1接种鸡胚进行病毒繁殖，经过收获鸡胚尿囊液、灭活、配苗等步骤可以制备出安全、有效的H3N2犬流感病毒灭活疫苗。
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公开(公告)号：CN103487590A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310394101.7
申请日：2013-09-03
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/80
CPC classification number: G01N33/80 , G01N33/721
Abstract: 本发明具体公开了一种血型抗体的间接Dot-ELISA检测方法与应用。所述方法为将硝酸纤维素膜固定于96孔板上，然后直接将红细胞膜包被硝酸纤维素膜上，与待测抗体反应，通过酶标二抗形成抗原-抗体复合物。所述Dot-ELISA板可以用商业化的ELISA检测分析仪器，进而能够达到自动化操作的目的，达到节省人力，减少人为误差，和高通量检测的目的。本研究用的斑点酶联免疫吸附测定方法是间接Coombs实验的8倍以上，高灵敏度可以增加低浓度和弱亲和抗体的检测准确度，进一步改进了血型检测方法和改善输血安全。
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