公开(公告)号：CN118620854A

公开(公告)日：2024-09-10

申请号：CN202410652489.4

申请日：2024-05-23

申请人： 上海智峪生物科技有限公司

发明人： 吴冬 ,  成丽丽 ,  侯丽丽 ,  朱书杰 ,  代陈胜 ,  朱敏 ,  郝子文 ,  步依繁 ,  郑良振 ,  王晟

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12P7/24 ,  C12P7/22 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种Iso突变体、基因工程菌株及其在合成香兰素中的应用，属于基因工程技术领域。本发明对4‑乙烯基愈创木酚加氧酶Iso的远离口袋中心的第27位、第77位、第91位、第139位、第156位、第227位、第417位、第434位中的任意一个或多个位点进行突变，获得能够高效催化阿魏酸通过两步酶法生成香兰素的基因工程菌株。利用所述基因工程菌株能够高效生成香兰素，100mmol/L底物浓度，香兰素转化率能够达到68.5％‑85.73％，产量能够达到10.41‑13.03g/L，具有良好的工业应用前景。

公开(公告)号：CN118374463A

公开(公告)日：2024-07-23

申请号：CN202410650535.7

申请日：2024-05-23

申请人： 上海智峪生物科技有限公司

发明人： 戴进 ,  吴秋秋 ,  梁琪鹏 ,  刘晶晶 ,  潘齐灿 ,  代陈胜 ,  凌远建 ,  步依繁 ,  郑良振 ,  吴冬 ,  王晟

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12P7/24 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了用于合成香兰素的4‑乙烯基愈创木酚加氧酶突变体及其工程菌，属于基因工程技术领域。本发明对4‑乙烯基愈创木酚加氧酶基因Iso的第27位、第156位、第216位、第351位中的任意两个或两个以上位点进行突变，获得4‑乙烯基愈创木酚加氧酶突变体。本发明成功构建了能够高效催化阿魏酸通过两步酶法生成香兰素的基因工程菌株，在酶反应体系中5h内能够催化产生香兰素最高达19.58g/L，传至1000代仍可稳定表达阿魏酸脱羧酶和4‑乙烯基愈创木酚加氧酶，且酶活力没有影响，实现天然香兰素的工业化生产，满足市场对于香兰素的需求。