本发明公开了一种集核酸提取、扩增与检测一体化的小型卡盒，包括套筒、外壳和底座组成的封闭卡盒，所述外壳内壁的上半部分包含两条中心对称的螺旋形轨道；所述套筒壁两侧设有两条对称的垂直导轨；还包括取液系统，包括依次连接形成联通气道的吸球、通气软管、吊杆和吸液管，所述套筒旋钮中空，用于容纳吸球，所述吊杆顶端的两端有两个凸起，其穿过套筒壁上的导轨而嵌入外壳内壁的螺旋形轨道中；还包括试剂仓，所述试剂仓设置于外壳下半部分；所述底座与外壳底部密封连接。本发明提供了一种集核酸提取、扩增与检测一体化的小型卡盒，可利用所述卡盒完成样本的核酸提取、靶标序列扩增和检测等全流程，大大减少对检测场所和技术人员的要求。