长链型重组人骨形态发生蛋白-2及其制备方法和应用
摘要:
本发明公开了一种长链型重组人骨形态发生蛋白-2及其制备方法和应用。本发明利用基因工程技术在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等表达系统中制备长链型重组人骨形态发生蛋白-2。本发明以人骨肉瘤细胞mRNA逆转录得到的cDNA为模板,扩增出编码羧基端自然结构成熟肽完整114个氨基酸的核苷酸序列,并在正向引物5’端第一个密码子之前增加一段核苷酸,使其对应的氨基酸序列在N端增加一段多肽,得到长链型rhBMP-2基因,分子量约为30KD,纯度达95%以上。该长链型rhBMP-2具有活性高、体内稳定性好,利于重组蛋白的表达、复性和分离纯化,利于活性蛋白在体内的稳定及活性的稳定发挥,适合于骨缺损填充、融合植骨等,尤其适合于椎体融合、骨折延迟愈合、骨不连、大段骨缺损的填充修复。
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