本发明公开了一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭III的方法，用70～80%乙醇提取红豆杉枝叶，得到水溶性浓缩液，静置后，不溶于水的紫杉醇及低极性杂质沉淀析出，10-去乙酰基巴卡亭III等较大极性的紫杉醇同系物留在水溶液中，过滤，得到固形物和水性滤液，滤液pH值5～6，用大孔吸附树脂吸附滤液中的10-去乙酰基巴卡亭III，吸附后，用无水乙醇洗脱被大孔吸附树脂吸附的10-去乙酰基巴卡亭III，乙醇洗脱液浓缩后，得到富集10-去乙酰基巴卡亭III的产物。本发明充分利用了红豆杉枝叶资源，既提取了紫杉醇，又提取了10-DABIII，提高了资源利用率，省去了液-液萃取步骤，减少了有机溶剂使用量，降低了成本，安全性高。