一种解淀粉芽孢杆菌来源的核糖核酸酶突变体及其构建方法，包括Barnase重组表达载体的构建：利用电转化技术，将重组载体pNZ8048‑SPusp45‑Ban‑Bas导入感受态乳酸乳球菌中，构建野生型表达载体，在此基础上，利用定点突变设计并构建Barnase第75位丝氨酸突变为组氨酸的突变体重组质粒，将其导入感受态乳酸乳球菌中构成突变体Barnase(S75H)的异源表达菌株，通过一种金属亲和层析法(Ni2+)来稳定的获得高活力的突变体核糖核酸酶Barnase(S75H)。该突变体的比酶活达到50.125kU/mg。