本发明公开了一种快速检测肺炎克雷伯菌的方法。该方法依次包括如下步骤：取固定了引物的载玻片，之后与能够被K.pTopIV融合蛋白特异识别的DNA底物进行杂交；加入待测样本和Mg2+，孵育；进行RCA反应，得到RCA产物；将探针和RCA产物进行杂交，根据杂交情况判断待测样本是否含有肺炎克雷伯菌和/或待测样本中肺炎克雷伯菌的含量；K.pTopIV融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；引物的3’末端与DNA底物的部分核苷酸序列反向互补；探针和与DNA底物的部分核苷酸序列相同或反向互补。采用该方法检测肺炎克雷伯菌，具有较高的准确性、特异性和敏感性。本发明具有重要的应用价值。