本发明公开了一种实验大动物猪的保定装置及应用方法，属于实验猪用设备技术领域，保定装置包括底板以及安装在底板上的框架，所述框架上滑动安装有两组相对设置的猪身保定架组，所述底板上设有四个分别用于放置猪四肢的凹槽，所述凹槽内滑动安装有两组弹性带组，两组弹性带组错位设置，滑动两组弹性带组能够绕过猪四肢以对猪四肢锁紧。本发明通过滑动两个猪身保定架即可对猪身固定，通过滑动预先平行设置的两个弹性带组使两个弹性带组绕过猪四肢后成“X”型设置，以对猪四肢锁紧，使对猪的保定操作简单，且保证了对猪的保定效果。