通式Ⅰ的β－内酰胺酶底物,其中X和Y之一个是发荧光的供体,而另一个是猝灭体(可以、或不可以再发射),R′选自H、低烷基(即1—5个碳原子)和(CH2)nOH(其中n是0或1—5整数);R″选自H、生理学可接受的金属或铵阳离子、－CHR2OCO(CH2)nCH3、－CHR2OCOC(CH3)3、酰基硫代甲基、酰氧－α－苄基、δ－丁内酯基、甲氧羰氧甲基、苯基、甲基亚磺酰甲基、β－吗啉乙基、二烷氨基乙基、酰氧烷基、二烷氨羰氧甲基、和脂肪基(其中R2选自H和低烷基);A选自S、O、SO、SO2和CH2;而Z′和Z″是发荧光的供体和猝灭体部分的接头。也介绍测试β－内酰胺酶活性、并监测使用β－内酰胺酶作为报告基因的体系中的表达之方法。