本发明公开了一种丝素蛋白凝聚胶的制备方法及其应用。所述丝素蛋白凝聚胶是以离子型表面活性剂与丝素蛋白为原料制备得到。离子型表面活性剂通过疏水相互作用驱动丝素蛋白溶液发生液液相分离现象形成丝素蛋白凝聚体，丝素蛋白凝聚体经固化后得到丝素蛋白凝聚胶；其中，所述丝素蛋白凝聚体由纳米液滴组成，纳米液滴之间能发生液滴融合。所述丝素蛋白凝聚胶具有成型快、韧性强、生物相容性好、湿态环境下黏合强度高等特点，能够在各种软组织和硬基质表面发生黏附，其制备方法简单易掌握，在生物医学工程、柔性电子器件、组织修复材料等领域具有广泛的应用前景。