本发明公开了一种含活性成分的结肠靶向多层纳米纤维膜及其制备方法与应用；结肠靶向多层纳米纤维膜为三明治结构，中间层为可纺聚合物/淀粉衍生物‑活性成分复合物，两外层为聚丙烯酸树脂Eudragit S100溶于乙酸得到外层纺丝液通过静电纺丝形成的纳米纤维膜；中间层为中间层纺丝液通过有针静电纺丝得到。本发明所得中间层纤维可以有效提高活性成分的溶解性和包埋率，改善活性成分的热稳定性和光稳定性；多层纳米纤维膜能显著增加活性成分在模拟结肠液中的释放量，实现活性成分结肠靶向释放的目的，为活性成分口服新型剂的开发提供新的思路。