本发明公开了一种无核酸提取的HLA‑B27检测试剂盒，本发明的检测试剂盒需要的血液样本量少，只需10μL血液即可进行检测，患者依从性更好，可收集指尖血样本，简化采样过程；对血液新鲜度要求低，长期冻存血样融化后可正常用于检测；不需要单独的提取仪器或提取试剂，只需简单的加热和离心，大大降低了仪器、试剂和人力成本；闭管检测反应，不涉及开管操作，不会产生扩增子污染，对实验场地要求低；本发明检测试剂盒的检测方法涉及PCR扩增和两步核酸侵入反应，检测信号放大效率高，检测灵敏度高。因此，本发明能够为临床提供更优的HLA‑B27检测工具，指导医疗资源紧缺地区的疾病筛查和诊断工作。