本申请涉及了一种电子显微镜图像的二次球尺寸测量方法、装置及设备，方法利用计算机视觉技术检测电子显微镜图像中的二次球，然后从图像中识别出比例信息，然后基于识别出的二次球的位置和边界信息确定二次球于图像中的尺寸，最后基于尺寸和电子显微镜放大的比例数字求出实际的尺寸。通过上述步骤实现对电子显微镜图像中二次球的高精度识别，快速准确地定位二次球的位置和边界信息，还能识别图像携带的比例信息，进而利用二次球的位置和边界信息和比例信息自动计算二次球的尺寸，提升了二次球尺寸测量的精确度和效率。