本发明涉及兽医药技术领域，具体涉及一种缓解鸡大肠杆菌感染的葎草提取物及其制备方法和应用。一种缓解鸡大肠杆菌感染的葎草提取物的制备方法，包括以下步骤：粉碎、浓缩、过滤、乙酸乙酯萃取、纯化、洗脱，将洗脱液减压浓缩，得到葎草提取物。通过应用网络药理学与分子对接方法筛选，确定了葎草中的最高效的抗菌活性成分为木犀草素，葎草提取物的制备方法可以有效保留木犀草素，经体内外实验验证，制得的葎草提取物可有效抑制大肠杆菌感染引起的鸡肠道炎症、心包炎等，降低炎症因子分泌，减轻各器官组织炎症损伤，可用于制备缓解鸡大肠杆菌感染的产品，为开发葎草对家禽的药理作用、降低家禽大肠杆菌感染提供了新的途径。