本发明属于兽用生物制品技术领域，涉及表达非洲猪瘟病毒相关抗原蛋白的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒的制备方法与应用，方法为以rJSTZ1712‑12为活病毒载体，利用同源重组或者双酶切连接方法在其ORF1b和ORF2a基因之间插入ASFV‑P17、ASFV‑P30、ASFV‑P54、ASFV‑P72蛋白编码基因序列或在其之间插入ASFV‑P30与ASFV‑P54编码基因序列通过两个丙氨酸（GCAGCA）连接构成二联基因序列ASFV‑P30‑P54；本发明所构建的嵌合病毒可用于研制同时抵抗ASFV和PRRSV流行株的新型基因工程疫苗，减轻多种病原多次免疫压力，有利于我国ASF和PRRS疫情的防控。