本发明公开了一种靶向H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的纳米抗体；所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；该纳米抗体具有良好的生物活性且具有良好的特异性；为建立H5亚型禽流感快速诊断方法奠定基础，解决了以往检测过程中灵敏度低，效率低的问题；而且将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白基因连接构建表达载体，诱导融合蛋白表达，抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白为可溶性蛋白，该融合蛋白可实现规模化生产，对H5禽流感的监测具有重大的意义。