本发明提供一种分析烟草中蛋白质含量的方法，包括以下步骤：1)将烟草样品采用三氯乙酸缓冲液进行沉淀提取，获得蛋白沉淀；2)将步骤1)获得的蛋白沉淀进行溶剂洗涤，获得蛋白样品；3)将步骤2)获得的蛋白样品加入消化试剂进行消化，获得待测蛋白消化液；4)将步骤3)获得的待测蛋白消化液采用连续流动法测定蛋白氮含量，进而确定烟草样品中蛋白质的含量。本发明提供的一种分析烟草中蛋白质含量的方法，可以直接提取烟草中的蛋白氮，蛋白质测定结果准确可靠，是烟草中蛋白质样品批量检测的有效手段。