本发明提供了一种检测结直肠癌的组合物、试纸及方法，涉及生物医药技术领域，首先通过试纸对待测血清样本进行检测，通过荧光侧向免疫层析技术，快速定量待测血清样品中血清蛋白标志物（癌胚抗原、甲胎蛋白和转铁蛋白）的浓度，并将血清蛋白标志物的浓度的数值代入本发明提供的结直肠癌综合指数公式CI=0.7016a+0.3152b‑1.295c‑2.3268中，对检测结果进行综合分析，若CI值在正常参考范围[‑3，3]内，则表明所述待测血清样品为阴性，否则为阳性。该检测方法综合考虑了血清样本中癌胚抗原、甲胎蛋白和转铁蛋白浓度对于结直肠癌检测的影响，准确率高达95%以上，明显高于采用单一血清蛋白标志物的检测方法。