本发明涉及液体菌种制种技术领域，具体是涉及一种食用菌液体菌种制种机。还涉及一种食用菌液体菌种制种机的使用方法。包括有制种罐和菌种瓶，制种罐包括有罐体、安装在罐体顶端的罐盖、设置在罐盖上的入料通道和旋紧在入料通道端部的密封盖，菌种瓶顶端设有密封塞，还包括有通道开合机构、环形点火机构和菌种自动上料机构，菌种自动上料机构包括有第一安装架、第一偏转架、倾倒组件、夹持组件、瓶体旋转组件和取塞组件，夹持组件、瓶体旋转组件和取塞组件均安装在第一偏转架上。本发明实现自动化无菌上料操作，避免了人工操作时的劳动强度大、接触火焰有烫伤的安全隐患，且实现了无菌化上料效果，保证了制种罐内菌种的纯净度，便于大规模生产。