本申请公开了一种重组人髓鞘少突胶质细胞糖蛋白及其制备方法和应用，其制备方法，包括：将opti‑MOG全长序列连接到pET28a载体上，形成pET28a‑opti‑MOG质粒，通过Dele MOG‑TM‑F和Dele MOG‑TM‑R引物反向扩增，获得PCR产物，将PCR产物和用DpnI酶切消化质粒模板进行自连，获得重组质粒；再将重组质粒导入大肠杆菌Rosetta菌株中，得重组菌株；进一步发酵培养、诱导表达和蛋白纯化。本发明方法制备得到的重组MOG蛋白，其表达量高、免疫原性好、纯度高，且应用其制备的试剂盒，与临床上MOG‑IgG的阳性和阴性的一致性较好。