本发明涉及一种碳酸酐酶人造酶及其制备方法和应用，属于人造酶的制备领域。本发明提供一种碳酸酐酶人造酶，所述人造酶由配体和锌盐通过水热法制得；其中，所述配体选自：1,4‑二(1H‑吡唑‑4‑基)苯，1,3‑二(1H‑吡唑‑4‑基)苯，2,7‑二(1H‑吡唑‑4‑基)萘，2,5‑二(1H‑吡唑‑4‑基)吡啶或2,7‑二(1H‑吡唑‑4‑基)芘。本发明所得人造酶具有较高的CA酶模拟活性，表现出优异的类CA反应动力学(Vmax:3.83µM s‑1，周转数(TON):5.97×10‑3 s‑1)，在所有报道的仿CA催化剂中具有超快和出色的活性。