本发明公开一种采后柑橘生物保鲜剂及保鲜方法和应用，所述保鲜剂按体积百分含量计算，包括产酶溶杆菌LE16自溶发酵液40~100%，咪鲜胺0%~60%，还包括吐温80 0.1%~0.2%。进一步还提供了所述保鲜剂在柑橘生物保鲜的应用和方法。本发明生物保鲜剂，其主要为产酶溶杆菌LE16的代谢产物对青酶和绿霉有明显的生防效果，降低柑橘果实保藏过程中的腐烂率，且不影响果实品质；自溶发酵液安全无毒，环境友好，生产方便可规模化应用；与化学农药配合，在获得同样防治效果的情况下，可大幅度减少农药施用量，减少农药残留，在采后柑橘保鲜方面有潜在的应用价值。