本发明属于生物技术领域，具体涉及一种弓形虫核酸疫苗及其构建方法。本发明将弓形虫RH毒株上的两个cDNA片段SAG2和SRS2分别或共同插入到真核载体pBudCE4.1上，获得重组质粒作为弓形虫核酸疫苗。本发明将弓形虫核酸疫苗对6‑8周昆明小鼠进行3次主动免疫，每次间隔两周，通过测定免疫鼠的细胞和体液免疫指标来评价疫苗的免疫原性，通过体内攻虫实验来评估疫苗的免疫保护性。本发明可有效地增强实验动物体液免疫和细胞免疫反应，有效地减少实验动物死亡数量。本发明的弓形虫核酸疫苗可作为预防弓形虫感染的有效候选疫苗。