本发明提供了一种基于13个Y染色体甲基化遗传标记的引物组及试剂盒，属于年龄推断技术领域，所述标志物包括：cg09728865、cg04691144、cg00876332、cg14303457、cg07939587、cg17816615、cg18085787、cg03055837、cg05408674、cg17834650、cg11816202、cg03672679和cg10959847；利用所述标志物构建SNaPshot复合体系对高覆盖年龄段男性样本进行检测，能够建立适用于中国汉族人群的男性年龄推断方法，为Y‑CpG在推断混合样本中男性年龄的应用提供科学依据。