本发明公开一种高稳定性银纳米团簇荧光探针及其制备方法与应用。该银纳米团簇荧光探针的制备方法包括以下步骤：将醛基化纳米纤维素溶液、银氨溶液和青霉胺溶液混合后，于室温、200～1500rpm条件下搅拌反应1～24h，待反应结束后，得到高稳定性银纳米团簇荧光探针；其中，醛基化纳米纤维素中的醛基含量、银氨溶液中的银氨络合离子与青霉胺的摩尔比为1：1～10：0.1～5。本发明制备过程简单、重复性高，制得的银纳米团簇在紫外灯光下(以黑色背景观察)呈现强烈的橙色荧光，其荧光量子产率高，稳定性性好，可用于重金属离子如铜离子和铁离子的检测。