本发明涉及皮革加工技术领域，提供了一种温和抗菌的皮革脱脂剂及其制备方法和应用。本发明提供了一种温和抗菌的皮革脱脂剂，由以下质量分数的组分组成：脂肪醇聚氧乙烯醚30～40％；直链烷基苯磺酸盐5～10％；季铵基类阳离子表面活性剂0.05～0.15％；低分子醇4～8％；水42～60％。本发明提供的皮革脱脂剂具有极强的渗透和乳化作用，脱脂率高，还具有抗菌作用，并且使用条件温和，适用范围广，使用方便，成本低廉。采用本发明的皮革脱脂剂对皮革进行脱脂处理，最终获得的脱脂皮革手感柔软，油脂含量低，有利于使成革达到理想状态。