本发明公开一种氟油组合物，包括氟油和表面活性剂，其中表面活性剂包括特定结构的化合物。本发明还提供上述氟油组合物的制备方法。本发明制得的氟油组合物作为PCR微滴生成的油相使用时，可以实现在液滴式数字PCR上的应用，且微滴具有一定的热稳定性，具有优越的表面性能。本发明制备过程中，使用氢氧化钠溶液和盐酸交替洗涤的方式进行纯化，使用氢氧化钠保护了氨基，可以提高氟油的微滴数量和微滴的形貌以及荧光强度，再用盐酸洗涤中和剩余的氢氧化钠。