本发明公开了氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的重组分枝杆菌噬菌体尾蛋白GP89，其能够特异性识别耻垢分枝杆菌，还公开了GP89‑eGFP融合蛋白以及GP89重组蛋白功能化磁性纳米颗粒，三者可用于制备耻垢分枝杆菌检测试剂；以GP89重组蛋白功能化磁性纳米颗粒作为耻垢分枝杆菌特异性捕获试剂、GP89‑eGFP融合蛋白作为荧光探针构建的耻垢分枝杆菌夹心荧光检测法，具有快速、方便、特异、灵敏、准确的优点，有望应用于分枝杆菌的现场检测和快速筛查，能够为临床诊断、食品安全和环境检测等领域检测分枝杆菌提供有力的技术支持。